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随着果蔬摄入与血管健康相关性的阐释及NO3-/NO2-、类黄酮血管生物学研究的深入,蔬菜中丰富的NO3-和果品中高含量的类黄酮摄入与血管内皮功能稳态之间的关系,已凸显为亟待解决的关键科学问题。本研究采用血管内皮功能评价体系,设计并制备富含类黄酮的苹果制剂和富含NO3-的菠菜制剂,研究了富含NO3-和类黄酮的饮食长期摄入对动物血管内皮功能的调节效应及其量-效关系,并考察类黄酮对NO3-代谢的间接干预的调节作用。本实验主要进行了以下几个方面的内容:(1)构建了HPLC-UV技术同时检测NO3-和NO2-的PFB-Br(五氟苄基溴)相转移催化衍生化方法,应用该方法分析测得新鲜的绿叶菠菜中含有丰富的NO3,几乎不含NO2-。(2)通过发展成熟的HPLC-UV技术对苹果果皮、果肉中类黄酮化合物的组成及含量进行了分析。结果显示,苹果果皮比苹果果肉含有更为丰富的类黄酮化合物和更高的类黄酮含量。苹果果皮中主要为金丝桃苷(Quercetin-3-O-galactoside)、槲皮苷(Quercetin-3-rhamnoside)、芦丁(Rutin)和绿原酸(Chorogenic acid)四种类黄酮成分,苹果果肉中主要为绿原酸、金丝桃苷和槲皮苷三种类黄酮成分。(3)经典的理论认为,体内NO(一氧化氮)只能通过内源性L-Arg(L-精氨酸)和NOS(一氧化氮合成酶)的作用合成。该实验验证了体内NO除了经典的内源性L-Arg-NOS-NO合成途径外,膳食NO3-是体内合成NO的另一个重要来源。由饮食摄入的NO3经还原为NO2,还原后的NO2进入体液,最终被还原,以NO的形式在体内被释放。(4)采用高脂高果糖饮食长期干预造成心血管内皮功能损伤的动物模型,通过菠菜NO3-不同剂量饮食、苹果类黄酮不同剂量(果皮类黄酮、果肉类黄酮)饮食及菠菜NO3和苹果类黄酮组合饮食长期摄入,研究果蔬NO3-和类黄酮对血管损伤动物的保护作用。分析实验动物血清和肝脏组织中TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)、GLU(血糖)和INS(胰岛素)的水平,计算其AI(动脉粥样指数)和HOMA-IR(胰岛素敏感指数)的值,以及测定脂质过氧化指标F21isoprostanes(异前列腺素)水平和血管因子NO、ET-1(内皮素-1),评价果蔬NO3-和类黄酮对心血管损伤的协同保护作用。研究发现,果蔬NO3-和类黄酮饮食长期干预实验动物均能有效降低TC、TG、LDL-C、GLU、INS的水平,减小A1和HOMA-IR,降低脂质过氧化程度和减少ET-1因子的释放,同时果蔬NO3-和类黄酮饮食可以增加HDL-C的含量,增加NO因子的释放,从而对血管损伤起到缓解和保护作用。(5)通过菠菜NO3-和苹果类黄酮组合饮食的对比研究表明,同时摄入富含NO3-菠菜和富含类黄酮苹果的饮食,比单纯的摄入富含NO3-的菠菜饮食和富含类黄酮的苹果饮食,其心血管保护效果更好,作用更明显。而且菠菜与苹果果皮组合效果比菠菜与苹果果肉组合更强。另外,在仅摄入富含NO3-的菠菜饮食时,高剂量NO3-饮食比低剂量和中剂量NO3-饮食的心血管保护作用更佳;在摄入富含类黄酮苹果饮食时,苹果果皮类黄酮饮食比苹果果肉类黄酮和完整苹果类黄酮饮食的心血管保护作用更好,效果更佳。本文首次采用富含NO3-的菠菜和富含类黄酮的苹果为原型食物,以高脂高果糖饮食长期饲喂干预造成心血管功能损伤的动物模型为评价载体,以接近原形食物本质的对照试验方式,系统地研究饮食NO3-和类黄酮对实验动物血管内皮功能的调节效应及其血管损伤保护作用。为准确阐释NO3-和类黄酮在维持血管生理功能中的作用及其血管分子营养机制提供新的理论依据。