野生大豆作为栽培大豆的近缘野生种,拥有丰富的种质资源。本试验通过对野生大豆在不同条件下进行不同浓度的草甘膦处理,通过筛选获得抗除草剂野生大豆;选取不同生境下的部分材料测定生理指标,结果表明在河北省地区露天盆栽条件下使用草甘膦进行600倍液浓度筛选效果更明显;对筛选出的抗性材料和敏感材料进行实时荧光定量PCR,分析其抗性基因EPSPS荧光表达量的变化趋势;抗性材料获得的cDNA进行PCR反应,对目的片段进行扩增和纯化,获得抗性基因。为今后培育抗除草剂优质品种奠定了基础。具体研究结果如下:1.种质筛选。根据往年的研究成果在田间对862份野生大豆进行400、600倍液浓度的草甘膦处理。二次筛选在温室盆栽,露天盆栽使用600倍液浓度草甘膦处理。选取两种生境下的部分材料测定生理指标,筛选出部分抗草甘膦野生大豆材料。2.抗草甘膦筛选方法优化。对部分材料进行生理指标测定,温室盆栽处理后的光合色素含量比露天盆栽材料下降较多,受药害严重,露天盆栽节约成本,筛选结果更准确。因此在河北省地区露天盆栽条件下使用草甘膦进行600倍液浓度筛选效果更明显。3.通过对材料进行表达量差异分析显示:草甘膦胁迫下野生大豆材料的EPSPS均有表达,荧光相对表达量在0~48h内表现为上升下降再上升的趋势。抗性材料对草甘膦胁迫能够迅速做出反应,EPSPS大量表达,而敏感材料则不能大量形成epsp合成酶,表现出严重草甘膦药害。4.克隆了草甘膦抗性材料2010编17的EPSPS基因完整开放阅读框CDS序列,cDNA全长1582bp,DNA序列和氨基酸序列与已注册信息均有差异。