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本论文通过在蛋鸡日粮中添加叶黄素,比较了不同叶黄素形态的生物利用效率,研究了叶黄素在蛋黄中的富集规律,建立了血浆中叶黄素的分离和测定方法,探讨了生产富含叶黄素保健鸡蛋的可能水平和有效途径。
试验一高效液相色谱( H P L C )法测定血浆叶黄素含量的研究
建立了一种分离和测定血浆中叶黄素的HPLC 法,采用XTerraRMSC18 色谱柱(3.9mm×150mm, 5μm),以甲醇-水(92:8)为流动相,检测波长为445nm,流速为1ml/min,进样量为1 0 μl。结果显示:高中低3 种质量浓度的平均回收率分别为90.22%、91.22%、105.32%,相对标准偏差(RSD)分别为1.58%、0.98%、0.32%。在0.245~9.8μg/ml检测范围内线性关系好, r=0.9995,完全满足分析需要。
试验二蛋鸡对叶黄素和叶黄素酯生物利用率的比较
选用产蛋后期海兰灰商品蛋鸡4 0 只,随机分为2 组,每组2 0 只,每只鸡为一个重复,试验期分为耗空期和正式期。耗空期2 w k ,饲喂低叶黄素类基础日粮。正式期1 2 d ,饲喂叶黄素强化日粮,分别由在基础日粮中添加叶黄素酯(Ⅰ组,由万寿菊粗提物提供)和游离叶黄素(Ⅱ组,市售产品提供)构成,含有效叶黄素均为1 5 m g / k g。于正式期d 0、3、7、1 2,每只鸡翅静脉采血,分离血浆,检测叶黄素含量,结果显示:耗空期结束时(正式期第0 d ),血浆中叶黄素含量为零;第3 d,两组血浆叶黄素的水平显著升高( P< 0 . 0 5 ) ;之后的时间内,两组血浆叶黄素都有上升,但各时间段变化均不显著( P> 0 . 0 5 ) 。整个正式期内任一时间点,Ⅰ组血浆叶黄素的水平比Ⅱ组都高,但差异不显著( P>0 . 0 5 ) ,说明两组叶黄素的利用效率是相当的。
试验三叶黄素在蛋黄中的沉积规律及其对蛋黄色泽和蛋鸡生产性能的影响
选用5 2 周龄绿壳(A C 土鸡)商品蛋鸡144 只,随机分为6 个处理,每个处理3 个重复,每个重复8 只鸡。在基础日粮上分别添加0、75、150、225、300、375mg/kg 有效叶黄素,饲喂28d。于试验结束时,测定各组蛋黄中叶黄素的含量及蛋黄亮值( L ) 、红值( a ) 、黄值( b ) ,分析叶黄素在蛋黄中的沉积规律,且在试验期内每周观测叶黄素对蛋黄罗氏等级值(RCF)和蛋鸡生产性能的影响。结果如下:
(1)蛋黄中叶黄素的沉积量随着日粮叶黄素水平的增加而增加,但转化效率逐渐降低。当叶黄素添加量为375mg/kg 时,叶黄素在蛋黄中沉积量达2.17mg/60g egg。各试验组蛋黄中叶黄素含量都与对照组有显著性差异( P< 0.05),当叶黄素的添加量大于225mg/kg 时,各试验组之间蛋黄中叶黄素的含量差异不显著( P> 0.05)。
(2)添加叶黄素后,蛋黄罗氏等级(RCF)急剧上升, 14d 后,各试验组的RCF 值都维持在10~13 范围内,不受叶黄素添加量的影响。第28d,添加叶黄素使蛋黄L 值显著降低( P< 0.05), a 值显著升高( P<0.05), b 值无明显变化( P> 0.05)。
(3)日粮中添加不同水平叶黄素不影响蛋鸡的生产性能( P> 0.05)。
从以上结果可以得出以下结论:本研究建立的H P L C 法可用于血浆中叶黄素含量的检测;蛋鸡对游离叶黄素和叶黄素酯具有相当的利用效率;蛋黄中叶黄素的含量可通过日粮来调控,最适游离叶黄素添加量为225mg/kg,此时蛋黄中叶黄素沉积量为1.94mg/60g egg,达到国外产品相近水平,并且蛋黄的色值好,蛋鸡的产蛋性能不受影响。