γ-干扰素对仔猪耳廓微循环相关因子蛋白质组学研究

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微循环障碍是疾病的一个重要表现。众多医学相关报道以鼠兔为动物模型研究微循环障碍的成因。但目前尚未见有关猪耳廓微循环障碍形成机理的研究报道。IFN-γ作为重要的前炎性因子,在微循环障碍发展过程中扮演着重要的角色。本实验以仔猪耳廓为研究对象,应用蛋白质组学方法,探讨了γ-干扰素对猪耳微循环相关因子变化的影响。方法:(1)对仔猪耳尖静脉分别注射IFN-γ或等体积的生理盐水,取耳尖组织,采用iTRAQ蛋白质组学方法,分析其蛋白质组学差异;(2)根据蛋白质组学结果,对其中表达差异明显的蛋白质用免疫组织化学方法确定其在组织中的定位,并对蛋白质组学结果进行验证。结果:(1)在2组样品中共同鉴定到蛋白质2444种,其中122种蛋白质在实验组中表现为显著的表达上调,102种蛋白质表现为显著下调;(2)2组样品间的差异蛋白在机体内执行的主要功能是血小板激活、脱氧核糖核酸酶活性调控和多细胞生物过程的正调控;(3)差异表达蛋白中显著富集的KEGG通路是植物病原菌互作过程、补体和凝血级联反应和NOD样受体信号通路。(4)内皮型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮定位在血管及毛囊的毛细血管网上,核因子-κB定位在毛囊的内根鞘和外根鞘,蛋白激酶C则定位在周围疏松结缔组织中;免疫组化结果与蛋白组学结果相符。本研究揭示了IFN-γ对猪耳廓微循环作用的可能机制,为后续研究猪耳廓微循环障碍形成机理提供理论依据。
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