本文研究了软肝散积方（AC-01）的抗肝纤维化作用及其机理。首先进行了AC-01对抗CCl<,4>诱导的急性肝损伤实验，初步确定了AC-01能预防肝损伤，具有保肝降酶的作用。其次，在此基础上分别采用CCl<,4>化学性和猪血清免疫性诱导的大鼠肝纤维化模型，检测大鼠血清谷丙转氨酶（sALT），血清谷草转氨酶（sAST），碱性磷酸酶（ALKP），胆汁酸（TBA），γ-谷酰转氨酶（γ-GT），总蛋白，白蛋白（ALB）等指标及肝组织羟脯氨酸（HYP）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；同时肝组织作HE染色并观察其病理学变化。研究揭示AC-01能有效地治疗肝纤维化，并有重建肝小叶的作用。为了证实AC-01对基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响，又进一步以CCl<,4>诱导的大鼠肝纤维化模型为对象，应用酶谱法、RT-PCR和Western blot的方法，观察肝组织内基质金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达，结果表明AC-01在mRNA和蛋白水平都能抑制其过量表达。由于肝纤维化时Ⅰ型胶原蛋白在肝脏内沉积，因此我们用SDS-PAGE、Westernblot的方法测定了猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型中Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果发现，AC-01能显著对抗肝纤维化所引起的Ⅰ型胶原蛋白沉积。实验证明，AC-01是通过影响细胞外基质来发挥其抗肝纤维化作用的。 四氯化碳（CCl<,4>）诱导的小鼠肝损伤主要是通过其对肝细胞线粒体的破坏造成的，而齐墩果酸（oleanolic acid，OA）则可以部分对抗这种损伤。本实验通过建立在体和离体两种模型研究了OA对CCl<,4>诱导小鼠肝细胞线粒体损伤的防护作用并探讨了OA的作用机制。 从在体实验的结果中可以发现预先给小鼠用OA灌胃可以明显抑制CCl<,4>造成的血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）的升高（分别为4.2倍和19.9倍），而且随着其浓度的增加，抑制率也增加。同时，一定浓度的OA还可以有效抑制CCl<,4>造成的小鼠肝细胞线粒体膜电位的改变（14.8％）和线粒体内的钙超载（2.1倍）。 为了证实OA对Ca<2+>诱导的小鼠肝细胞线粒体通透性转换（MPT）的影响，采用离体实验测定了在OA的作用下Ca<2+>诱导线粒体的膜电位、基质钙的释放和线粒体的肿胀程度的变化，结果发现，用50或100μg·ml<-1>OA预孵化可以明显抑制Ca<2+>引起的线粒体肿胀，线粒体膜去极化和线粒体内钙的外溢。这证明OA可能是通过抑制MPT来达到保护肝细胞线粒体的目的。 肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和必经途径，是肝内细胞之间及其与细胞外基质（extracellular matrix，ECM）相互作用的结果，最终导致ECM在肝内过度沉积。目前认为肝纤维化的形成是由于各种损肝因子引起肝细胞损伤、坏死、凋亡及肝组织炎症反应，激活kupffer细胞分泌多种细胞因子，与肝细胞、血小板及窦内皮细胞分泌的细胞因子、脂质过氧化产物等化学递质，共同作用于肝星状细胞（hepatic stalletecell，HSC），并激活转变为肌成纤维细胞，发生表型及功能改变，通过旁分泌或自分泌机制，使肌成纤维细胞增殖，合成大量的胶原和蛋白多糖等ECM。这个病理过程非常复杂，深入了解肝纤维化的发生机制可为临床提供有效的治疗方案。 肝纤维化是指肝脏内纤维性结蒂组织异常增生。肝纤维化是慢性肝病最重要的病理特征也是慢性肝炎、肝硬变等进一步发展恶化的重要原因。目前认为肝纤维化是肝损伤持续存在，组织发生修复时细胞外基质合成与降解失衡而引起的病理改变，是涉及复杂的细胞及分子机制的动态过程。HSC激活并转化为肌成纤维细胞样细胞是肝纤维化发生发展的核心环节。近年来随着细胞和分子生物学技术的进步，对肝原纤维及基质的生成与分解有了更多的阐明，认为肝纤维化的发生与肝细胞（包括实质细胞和非实质细胞）、细胞因子和细胞外基质等因素有关。 1 肝脏细胞在肝纤维化中的作用 窦周的肝细胞、HSC、内皮细胞、Kupffer细胞，肝间质的成纤维细胞、胆管细胞、平滑肌细胞以及由血循环移入的淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、肥大细胞、血小板等均参与肝纤维化的发生和发展。其中HSC的增生和激活是肝纤维化形成的中心环节。 1.1肝星状细胞 HSC位于肝细胞和肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cell，SEC）之间的Disse腔内。在正常肝脏内，HSC处于静息状态，胞体内含类视黄醇物质的脂滴，其数量约占间质细胞总量的三分之一。其主要功能是储存和代谢视黄醇、参与ECM的转化、调节肝窦血流。