淫羊藿素抑制肺癌A549细胞增殖的机制研究

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肺癌发生于支气管粘膜上皮,也可称为支气管肺癌,在目前全世界癌症死亡原因中排名第一。自1995年起,全世界肺癌死亡人数超过60万,而且每年的死亡人数逐年增加。因此,研究肺癌的治疗手段和治疗药物对于中国人的健康来说意义重大。淫羊藿历来都是我国传统中药中的一味补益药材,在历代医学书籍中都有记载。它具有坚筋骨、补肾阳等药用价值。淫羊藿素是淫羊藿中的一种活性单体成分。具有心血管保护、促进骨质形成、调节机体的免疫能力、抑制癌症等重要功效。目前对于淫羊藿素的抑癌作用机制研究比较少,其抗癌的作用机理尚不明了。本文以人肺癌A549细胞、肝癌HepG2细胞、神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y、前列腺癌PC-3细胞、卵巢癌A2780细胞为材料,检测淫羊藿素对人体多肿瘤细胞系的抑制作用;采用MTT、RT-PCR、Western blotting等方法着重研究了淫羊藿素对人肺癌A549细胞增殖的影响,主要研究结果如下:(1)淫羊藿素可有效抑制多种肿瘤细胞系增殖,并且抑制能力呈现剂量和时间依赖性。MTT实验表明,淫羊藿素对A549细胞增殖的抑制,随着药物浓度的增高、作用时间的延长,其作用效果越强。(2)药物处理A549细胞24h后,结果显示,随着药物浓度的增加,细胞表现出明显的S期周期阻滞。RT-PCR结果显示,细胞周期蛋白Cyclin A和其依赖性激酶CDK2在转录水平上的表达明显减弱,表现出了明显的淫羊藿素剂量依赖性,与流式检测的周期结果相一致,证明淫羊藿素使A549细胞阻滞于S期。(3)运用Hoechst33342染色和Annexin-FITC/PI双染方法检测A549细胞凋亡情况,发现它呈明显的浓度依耐性。 RT-PCR检测P53和P21的转录量增高,表明淫羊藿素对肿瘤细胞产生了明显的促凋亡效果。(4) RT-PCR检测不同浓度淫羊藿素处理24h后的A549细胞中Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。实验表明,处理后的A549细胞中Bcl-2的mRNA水平明显下降,Bax的mRNA表达水平明显上升,说明淫羊藿素能有效调控肿瘤细胞中的Bax/Bcl-2信号通路从而抑制肿瘤细胞增殖。
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