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近年来纳米材料在生物医学等诸多领域的应用不断扩大,同时其生物安全性问题也受到广泛重视。因此本实验通过纳米SiO2的细胞毒性研究,为纳米材料的安全应用提供实验依据。
本实验采用粒径21.6nm和48.6nm两种尺度的纳米SiO2为材料,以人正常肺细胞株MRC-5为对象,在细胞培养液中加入不同浓度的SiO2悬液作为暴露途径。通过MTT实验测定细胞毒性,HE染色观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞凋亡以及细胞内活性氧的含量测试,研究纳米SiO2的细胞毒性及其可能机制。
结果显示:纳米SiO2暴露后,细胞形态发生明显改变,细胞生长受到抑制,并且随着暴露剂量和暴露时间的增加,细胞死亡率显著增高,两种尺度纳米SiO2的半数抑制浓度分别为0.8mg/ml和1.9mg/ml。流式细胞仪检测结果表明,SiO2暴露后亚G1期细胞数增加明显,提示SiO2可引起细胞凋亡。另外,随着纳米SiO2暴露浓度的升高,细胞内的活性氧自由基水平逐渐升高,而与自由基清除有关的谷胱甘肽和超氧化物歧化酶含量逐渐降低,说明SiO2暴露可引起细胞氧化应激反应,导致细胞内氧化还原失衡而影响细胞机能。
上述结果表明,纳米SiO2暴露对人正常肺细胞MRC-5具有明显的毒性作用,其毒性与暴露剂量和时间密切相关,即有明显的“剂量—毒性”和“时间—毒性”效应关系;此外纳米SiO2的颗粒粒径越小,毒性越大。这种毒性主要表现为暴露引起的细胞凋亡;而细胞氧化损伤是纳米SiO2细胞毒性的重要机制之一。