不同表型Th17细胞特征性分泌因子(IL-17/IFN-γ)对原代成骨细胞体外增殖、分化与钙化功能的影响

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目的:探讨不同表型辅助性T细胞17特征性分泌因子白细胞介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)单独和联合后对原代成骨细胞增殖、分化及钙化功能的体外调控作用,并对其介导骨改建的机制进行初步探讨。方法:采用酶消化法分离并以成骨诱导液诱导培养小鼠原代颅骨成骨细胞,实验分为IL-17组、IFN-γ组、IL-17联合IFN-γ组、单纯诱导组和正常对照组。MTT检测24h,48h,72h,96h时原代成骨细胞的增殖活性,碱性磷酸酶活性和茜素红染色法检测碱性磷酸酶(ALP)和钙结节含量变化,real-time PCR检测各组细胞不同时间成骨细胞相关标志ALP、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)及骨保护素(OPG)、核因子KB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达,western blot检测JAK2/STAT3通路相关分子、RANKL和OPG蛋白表达。结果:倒置显微镜下观察原代成骨细胞多为单核、梭形及多边形,茜素红染色可见红色钙结节形成。IL-17组、IFN-γ组、联合组和单纯诱导组均可促进成骨细胞增殖(P<0.05);ALP活性检测发现IL-17组、联合组的ALP表达水平均显著高于IFN-γ组、单纯诱导组和正常对照组(P<0.05);PCR结果显示IL-17组、IFN-γ组和联合组的ALP、RUNX2、OPG和RANKLmRNA水平较单纯诱导组显著增高,IL-17组的OCNmRNA水平明显高于单纯诱导组(P<0.05);然而,茜素红染色定量分析发现IL-17组、IFN-γ组和联合组的钙结节含量均低于单纯诱导组;此外,IL-17组p-JAK2、p-STAT3、RANKL蛋白表达以及RANKL/OPG数值均显著高于单纯诱导组(P<0.05)。结论:不同表型Th17细胞特征性分泌因子IL-17、IFN-y单独和联合后均能对原代成骨细胞分化起促进作用,对钙化起抑制作用,而IFN-γ会减弱IL-17的促成骨分化能力。同时,IL-17可通过JAK2/STAT3通路促进成骨细胞分泌RANKL。研究目的:观察自体浓缩生长因子(Concentrated growth factor,CGF)在牙周引导性组织再生(guided tissue regeneration,GTR)治疗中的临床效果,评价CGF在牙周组织再生中的作用。研究方法:纳入需进行手术的3例慢性牙周炎患者,在牙周基础治疗之后,采用引导性组织再生术联合CGF进行治疗。在此期间,定期牙周维护,在术前和术后6个月分别对患牙进行临床检查,记录牙周袋探诊深度PD,牙龈探诊出血BOP和角化龈宽度并进行比较,使用X线片评估治疗前后牙槽骨增量情况。研究结果:3位患者手术部位牙龈均无明显感染,创口愈合为一期愈合。术后3、6、12个月复查,均无牙齿敏感、咬合疼痛等不适主诉症状。部分位点角化龈宽度增加,X线片显示局部骨密度明显增高。结论:自体浓缩生长因子可一定程度上促进引导性组织再生术在慢性牙周炎中的治疗效果。
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