【摘 要】
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随着国内经济进入新常态阶段,进一步加剧了企业间的竞争。面对着目前国内工业增长放缓、需求不足以及市场的频繁波动,使得企业内部控制在企业发展过程中的作用日趋显著。内部控制是现代企业制度的重要组成部分,是衡量现代企业管理水平高低的重要标志之一。很多大型企业失败的经验教训告诉我们,企业经营失败在很大程度上是由于企业内部控制缺少或失效造成的。对于港口物流企业来说,资金需求量大、周转量大、周转环节复杂、对外部
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随着国内经济进入新常态阶段,进一步加剧了企业间的竞争。面对着目前国内工业增长放缓、需求不足以及市场的频繁波动,使得企业内部控制在企业发展过程中的作用日趋显著。内部控制是现代企业制度的重要组成部分,是衡量现代企业管理水平高低的重要标志之一。很多大型企业失败的经验教训告诉我们,企业经营失败在很大程度上是由于企业内部控制缺少或失效造成的。对于港口物流企业来说,资金需求量大、周转量大、周转环节复杂、对外部环境的反应比较敏感等都是这一类型企业共同的特点。在港口物流型企业中,资金主要以存货、固定资产和无形资产的
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β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶H(EndoH)能够专一性识别并切割寡糖链中N-乙酰葡萄糖胺核心中的β-1,4-糖苷键,从而形成一个N-乙酰葡萄糖胺糖蛋白结构,而且对蛋白质去糖基化并不影响蛋白质的生物学功能。因此,EndoH被广泛应用在糖生物学和糖组学的研究当中。本研究根据GenBank公布的阿维链霉菌Streptomyces avermitilis中EndoH的DNA序列,构建pMA0911.1-en
木聚糖酶和木糖苷酶是木聚糖水解酶系的主要组分,与纤维素酶有着良好的协同水解作用,在木质纤维素原料高效水解中具有巨大的应用前景。然而,针对目前该领域所用木聚糖酶和木糖苷酶用量大,酶活低等缺点,本文采用异源表达方式,以毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)为表达宿主,构建高产木聚糖酶和木糖苷酶重组菌株,并对重组菌产酶条件和酶学性质进行了研究。高产木聚糖酶和木糖苷酶重组菌的构建主要通过两
L-丝氨酸(L-Serine,L-Ser)作为非必需氨基酸,参与生物体内大量的代谢,广泛应用于食品、化妆品和医药等领域。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)SYPS-062-33a?SSA(简称33a?SSA)是通过诱变和代谢工程改造获得的一株高产L-丝氨酸的菌株,其可利用多种糖质原料为碳源,当菌株以蔗糖为碳源时,L-丝氨酸产量最高。然而,该菌株存在蔗糖利用效率不高
羰基还原酶(EC 1.1.1.X)具有高度化学、区域和立体选择性,在生物催化手性化合物方面极具潜力。来源于近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)CCTCC M203011的(S)-羰基还原酶II(SCRII)催化2-羟基苯乙酮转化为(S)-苯乙二醇。论文通过优化SCRII与葡萄糖脱氢酶(GDH)最佳催化酶活配比,设计了双酶偶联的大肠杆菌中的共表达体系,实现重组菌高效转化(S)-
红曲菌摇瓶液态发酵生产莫纳克林(Monacolin K,简称MK)的产量已经达到较高水平,且发酵工艺条件比较成熟,为实现液态发酵罐发酵提供基础。由于摇瓶发酵和发酵罐发酵条件不同,掌握菌体形态对红曲菌液态发酵罐发酵产MK的影响,提高红曲菌发酵生产MK的水平。本课题在5~1500 L发酵罐中进行了红曲菌液态发酵生产MK的实验,重点开展了发酵条件、菌体形态及菌体量、代谢产物三者关联性的研究,具体分为以下
L-天冬酰胺酶(L-AsnE,E.C.3.5.1.1)可催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸和氨。因其能水解L-天冬酰胺(丙烯酰胺的前体)而有效降低油炸食品中潜在致癌物质丙烯酰胺的含量,在食品安全领域受到高度关注。课题组前期克隆了来自Bacillus subtilis B11-06的L-AsnE基因(ansz),将其在安全宿主B.subtilis 168中过量表达,获得重组B.subtilis L
Clostridium clariflavum DSM 19732是一种可产生纤维小体的厌氧梭菌,可分泌多种木质纤维素降解酶,对半纤维素的降解能力非常高,但关于这些酶的性质并无相关报道。本实验室前期筛选到一组复合菌系RXS,其关键菌之一为C.clariflavum。本文即以复合菌系RXS的总基因组DNA为模板,克隆了C.clariflavum DSM 19732的两个木聚糖酶基因xyn2083和x
本论文以大肠杆菌Escherichia coli w3110为底盘微生物,通过设计L-苹果酸一步合成途径:丙酮酸直接羧化生成L-苹果酸,并借助代谢工程、蛋白质工程和辅因子工程等技术策略,构建并优化苹果酸高效合成途径,实现L-苹果酸的高效积累。主要研究结果如下:(1)高效积累丙酮酸的底盘微生物构建。采用多基因组合敲除策略对参与丙酮酸代谢进而生成代谢副产物的相关途径关键酶进行阻断,在E.coliw31
反式-4-羟脯氨酸(trans-4-hydroxyproline,Hyp)在医药健康、化学合成、美容以及食品营养等领域有广泛应用。最初是通过动物胶原蛋白水解获得,但是产率极低。从指孢囊菌RH1(Dactylosporangium sp.RH1)中发现的脯氨酸-4-羟化酶(proline 4-hydroxylase,P4H)可以催化游离的L-脯氨酸生成Hyp,使得微生物酶法生产Hyp成为可能。本课题
阿魏酸酯酶(FAEs,EC 3.1.1.73)在造纸、食品、医药、纺织、饲料加工、生物合成及能源开发等领域具有广泛的应用前景而受到世界范围的关注。微生物来源的阿魏酸酯酶主要集中在青霉和曲霉,细菌如乳酸杆菌也能产生,至今没有大肠杆菌阿魏酸酯酶的报导。挖掘并研究新酶资源有利于丰富产生菌来源种类,得到特异性强、适应性好的阿魏酸酯酶。论文对大肠杆菌基因组中可能具有阿魏酸酯酶活性的基因进行了克隆表达;阿魏酸