【摘 要】
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L-天冬酰胺酶(L-AsnE,E.C.3.5.1.1)可催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸和氨。因其能水解L-天冬酰胺(丙烯酰胺的前体)而有效降低油炸食品中潜在致癌物质丙烯酰胺的含量,在食品安全领域受到高度关注。课题组前期克隆了来自Bacillus subtilis B11-06的L-AsnE基因(ansz),将其在安全宿主B.subtilis 168中过量表达,获得重组B.subtilis L
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L-天冬酰胺酶(L-AsnE,E.C.3.5.1.1)可催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸和氨。因其能水解L-天冬酰胺(丙烯酰胺的前体)而有效降低油炸食品中潜在致癌物质丙烯酰胺的含量,在食品安全领域受到高度关注。课题组前期克隆了来自Bacillus subtilis B11-06的L-AsnE基因(ansz),将其在安全宿主B.subtilis 168中过量表达,获得重组B.subtilis L-AsnE,但是其比酶活和温度稳定性尚不能满足食品行业的应用。鉴于此,本研究通过定点突变的方式对B.su
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丁醇作为一种新型生物能源,具有能量密度高、腐蚀性低等优点。化石能源危机引起生物质能源的研究热潮,利用微生物发酵的方法来制备丁醇较化学合成法而言,具有环保且操作简便等优点。木质纤维素是最为丰富而廉价的生物质资源,但是不能被产丁醇菌株直接利用;利用酸或碱水解木质纤维素虽然能够产生可被微生物利用的糖类,但同时会产生抑制微生物生长的化学物质,这限制了木质纤维素水解液在丁醇发酵中的应用。本文以筛选获得的丙酮
纤维素酶Cel5A与Cel6A缺乏是限制纤维素酶制剂高效酶解纤维素的关键因素。本文尝试构建高效表达里氏木霉Cel5A与Cel6A的毕赤酵母重组菌株以弥补目前Cel5A与Cel6A天然分泌不足,通过基因密码子偏好性优化、GC含量调整与mRNA二级结构预测等手段优化里氏木霉Cel5A与Cel6A基因,构建表达载体pPIC9K-eg2与pPIC9Kcbh2,将其分别电转化导入毕赤酵母GS115以构建诱导
4-α-糖基转移酶(4-α-glucanotransferase)是一种多功能酶,可以催化环化、歧化、水解和偶合四种反应,其中,它能够通过环化作用使直链淀粉发生分子内转糖基作用制备大元环糊精。大元环糊精(Cycloamylose,CA)是指聚合度在9至几百的环状糊精,具有较大的疏水内腔以及较高的水溶性,可以用于包埋保护一些化学稳定性差的物质,在食品、生物、化学、医药等领域前景可观。本研究分别将超嗜
N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)是氨基葡萄糖(Glucosamine,GlcN)的衍生物,在保健食品和医药领域具有广泛应用。目前,GlcNAc的主要生产方法有酸水解法、酶水解法、化学合成法以及微生物发酵法。本论文采用微生物发酵法来合成GlcNAc,以一株可合成GlcNAc的重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为出发菌株,优化GlcNAc代
本研究的目的是寻找精氨酸代谢途径中与酸胁迫相关的关键作用因素。通过构建重组菌株Lactococcus lactis NZ9000(p NZ8148-argG)与Lactococcus lactis NZ9000(pNZ8148-argH)使ArgG和ArgH蛋白在Lactococcus lactis NZ9000中成功表达。与对照菌株相比,重组菌株在多种环境胁迫下表现出较高的生长性能、存活率以及发
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶H(EndoH)能够专一性识别并切割寡糖链中N-乙酰葡萄糖胺核心中的β-1,4-糖苷键,从而形成一个N-乙酰葡萄糖胺糖蛋白结构,而且对蛋白质去糖基化并不影响蛋白质的生物学功能。因此,EndoH被广泛应用在糖生物学和糖组学的研究当中。本研究根据GenBank公布的阿维链霉菌Streptomyces avermitilis中EndoH的DNA序列,构建pMA0911.1-en
木聚糖酶和木糖苷酶是木聚糖水解酶系的主要组分,与纤维素酶有着良好的协同水解作用,在木质纤维素原料高效水解中具有巨大的应用前景。然而,针对目前该领域所用木聚糖酶和木糖苷酶用量大,酶活低等缺点,本文采用异源表达方式,以毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)为表达宿主,构建高产木聚糖酶和木糖苷酶重组菌株,并对重组菌产酶条件和酶学性质进行了研究。高产木聚糖酶和木糖苷酶重组菌的构建主要通过两
L-丝氨酸(L-Serine,L-Ser)作为非必需氨基酸,参与生物体内大量的代谢,广泛应用于食品、化妆品和医药等领域。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)SYPS-062-33a?SSA(简称33a?SSA)是通过诱变和代谢工程改造获得的一株高产L-丝氨酸的菌株,其可利用多种糖质原料为碳源,当菌株以蔗糖为碳源时,L-丝氨酸产量最高。然而,该菌株存在蔗糖利用效率不高
羰基还原酶(EC 1.1.1.X)具有高度化学、区域和立体选择性,在生物催化手性化合物方面极具潜力。来源于近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)CCTCC M203011的(S)-羰基还原酶II(SCRII)催化2-羟基苯乙酮转化为(S)-苯乙二醇。论文通过优化SCRII与葡萄糖脱氢酶(GDH)最佳催化酶活配比,设计了双酶偶联的大肠杆菌中的共表达体系,实现重组菌高效转化(S)-
红曲菌摇瓶液态发酵生产莫纳克林(Monacolin K,简称MK)的产量已经达到较高水平,且发酵工艺条件比较成熟,为实现液态发酵罐发酵提供基础。由于摇瓶发酵和发酵罐发酵条件不同,掌握菌体形态对红曲菌液态发酵罐发酵产MK的影响,提高红曲菌发酵生产MK的水平。本课题在5~1500 L发酵罐中进行了红曲菌液态发酵生产MK的实验,重点开展了发酵条件、菌体形态及菌体量、代谢产物三者关联性的研究,具体分为以下