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目的1.检测不同方法处理纯化的脂肪组织的细胞形态、含水量及细胞外油脂含量、SVF细胞及脂肪来源干细胞数量、血液来源细胞数量与甘油三磷酸脱氢酶活性等各项指标,比较不同的脂肪处理纯化方法对移植脂肪组织的影响。2.不同方法处理纯化的脂肪组织移植于裸鼠皮下,通过检测新生组织的重量及组织学特性,评价不同的脂肪处理纯化方法对移植脂肪组织成活率的影响。3.以棉垫吸附浓缩法处理纯化的自体脂肪组织移植治疗小乳症及乳癌术后乳房缺失患者,通过评价该手术方法的治疗效果,证实棉垫吸附浓缩是较为理想的脂肪处理纯化方法。方法1.检测不同方法处理纯化的脂肪组织的各项指标,共分为四组：静置沉淀组、清洗沉淀组、离心组与棉垫吸附浓缩组。观察检测以下内容：(1)脂肪细胞完整性,(2)纯化脂肪组织含水量及细胞外油脂含量,(3)基质血管成分(SVF)细胞数量、脂肪来源干细胞(ADSC)数量及血液来源细胞数量(4)甘油三磷酸脱氢酶(G3PDH)活性。2.检测不同方法处理纯化的脂肪组织在裸鼠体内的移植效果,按静置沉淀法、清洗沉淀法、离心法与棉垫吸附浓缩法分为四组,每组15只裸鼠。脂肪组织移植分三次进行,每次实验脂肪组织取自于一位患者,脂肪的获取、分组和处理纯化方法与第一部分相同。取材后作新生脂肪组织重量测量和组织学特性评价。3.以棉垫吸附浓缩法处理纯化的自体脂肪组织移植治疗小乳症及乳癌术后乳房缺失患者,随访患者术后满意度,测量自体脂肪隆乳患者术前术后胸围变化,比较患者术前术后照片,axisthree三维立体模拟成像仪测量术前术后乳房体积变化,体格检查及MRI检查有无囊肿与肿块形成。结果第一部分(1)脂肪组织HE与免疫组织化学染色显示：静置沉淀,清洗沉淀,离心和棉垫吸附浓缩四种不同的脂肪纯化方法各组之间细胞完整性无明显差别。(2)脂肪组织含水量：静置沉淀组和清洗沉淀组高于离心组和棉垫吸附浓缩组(p<0.01)。细胞外油脂含量：棉垫吸附浓缩组小于其余各组(p<0.05),离心组小于静置沉淀组和清洗沉淀组(p<0.05)。(3)SVF细胞数量：静置沉淀组小于离心组与棉垫浓缩组(P<0.05),其余各组间均无统计学显著性差异。(4)流式细胞分析：CD45(+)静置沉淀组高于棉垫浓缩组(P<0.05),CD31(+)CD45(-)清洗沉淀组高于静置沉淀组(P<0.05),其余各组间均无统计学显著性差异。(5)甘油-3-磷酸脱氢酶活性：静置沉淀组和清洗沉淀组小于离心组和棉垫浓缩组(P<0.05),其余各组间均无统计学显著性差异。第二部分(1)新生组织重量：棉垫吸附浓缩组(0.149±0.068g)大于静置沉淀组(0.081±0.041g)、清洗沉淀组(0.093±0.060g)和离心组(0.085±0.053g)(p<0.05)。其余各组间新生组织重量均无统计学显著性差异。(2)新生组织HE染色：各组新生组织在其完整性,囊肿或空泡形成,纤维化与炎性细胞浸润等各方面均无明显差异。(3)周脂素蛋白免疫组织化学染色：棉垫吸附浓缩组新生组织周脂素蛋白免疫组织化学染色阳性的再生细胞多于其余各组,其余各组间未见明显差异。第三部分(1)以棉垫吸附浓缩法处理纯化的自体脂肪组织移植治疗小乳症,效果确切,术后乳房外形自然、质地柔软,患者术后满意度高,胸围变化明显,脂肪成活率达44.4±6.6%。(2)以棉垫吸附浓缩法处理纯化的自体脂肪组织移植治疗乳癌术后乳房缺失患者,手术创伤小,效果好,患者术后满意度高。结论1.从体外的实验结果看,离心组与棉垫吸附浓缩组的多项指标均优于静置沉淀组与清洗沉淀组,尤其是脂肪组织的含水量和细胞外油脂含量均明显少于静置沉淀组与清洗沉淀组；但从动物实验结果看,脂肪组织成活率在静置沉淀组、清洗沉淀组与离心组并没有达到统计学显著性差异,而棉垫吸附浓缩组脂肪组织成活率明显高于其他三组,具有统计学显著性差异。所以,棉垫吸附浓缩法是较好的脂肪处理纯化方法。2.自体脂肪颗粒是一种良好的软组织填充物,以棉垫吸附浓缩法处理纯化的自体脂肪组织移植治疗小乳症及乳癌术后乳房缺失患者,可以获得比较满意的临床效果,棉垫吸附浓缩法是值得推广的脂肪处理纯化方法。如何提高自体脂肪移植后的脂肪组织成活率一直是自体脂肪移植领域的研究重点,脂肪组织成活率与脂肪的处理纯化技术密切相关。处理纯化后的脂肪组织应含尽量少的水、油脂颗粒、血液来源细胞以及细胞碎片,尽可能保持脂肪细胞的完整性,且富含脂肪干细胞。目前,脂肪的处理纯化方法主要有静置沉淀法、清洗沉淀法、离心法与过滤浓缩法等。静置沉淀与清洗沉淀法处理纯化的脂肪组织,含水量高达30%左右；自体脂肪移植隆乳需要大量脂肪,离心法处理纯化过程复杂,时间长,操作离开手术台,易受污染,增加了手术感染的可能性。国外还有应用密闭系统过滤浓缩,耗材费用高,加重了患者的经济负担。本临床实践中采用棉垫吸附浓缩法处理纯化脂肪组织,方法简单、高效。所有操作过程均在手术台上完成,避免了污染的可能性。本方法在临床实践中效果好,满意度高,并发症少,无一例临床感染病例。该方法具有临床推广价值。