研究背景与目的: 原发性肝癌为世界上最常见的恶性肿瘤之一，近年来随着医学技术的发展原发性肝癌的治疗措施不断改善，但肝癌的总体预后仍不能令人满意，原因之一是原发性肝癌易于复发转移。因此抗肝癌的侵袭转移是目前肝癌治疗的一个难点与热点。鉴于抗癌侵袭转移需较长时间用药，从毒副作用较小的天然植物中提取的抗癌药物，逐渐成为一个密切关注的新领域。三氧化二砷(As<,2>O<,3>)具有诱导细胞分化、凋亡及细胞毒作用，最早运用于急性早幼粒细胞性白血病。近来许多实验和临床研究也证实三氧化二砷对多种消化系肿瘤的增殖有一定的抑制作用，但对其抑制侵袭转移方面的研究却少有报道。但三氧化二砷潜在的毒副作用以及肝癌患者肝功能储备能力相对较差使其在肝癌较长时间的运用中受到一定程度的限制。人参皂甙Rg3是从人参中提取的单体成分，具有较低的毒副作用。多项研究已证实人参皂甙Rg3具有抑制肿瘤细胞粘附、侵袭转移的作用，并对化疗具有增效减毒作用。因此实验探讨三氧化二砷和人参皂甙Rg3 (Rg3)联合用药对人肝癌细胞株侵袭转移能力的影响以及与单独运用的差异，并进一步探讨其可能的影响机制，为临床联合抑制侵袭转移治疗、减轻药物毒副作用提供实验依据与理论基础。 方法: (1) 检测经不同浓度的As<,2>O<,3>和Ginsenoside Rg3处理过的人肝癌SMMC-7721细胞株的吸光度值(OD值)，计算细胞生长抑制率，并绘制随药物浓度变化的细胞生长抑制曲线；计算出两药的IC<,50>，为下一步侵袭转移实验提供合适的药物浓度。 (2)不同浓度的As<,2>O<,3>(0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL)和Ginsenoside Rg3(10.0μg/mL)对人肝癌SMMC-7721细胞分别单独与联合处理72h后，MTT法检测人肝癌细胞对人工基底膜matrigel粘附能力的改变。 (3)As<,2>O<,3>(0.5μg/ml)和Ginsenoside Rg3(10.0μg/mL)分别与联合作用人肝癌SMMC-7721细胞72h，用无血清培养基配制成细胞悬液，分别转移至transwell小室(包被/无包被matrigel)的上室继续培养24h，光镜下观察并计算迁移至下室滤膜的细胞数。 (4)As<,2>O<,3>(0.5μg/ml)和Ginsenoside Rg3(10.0μg/mL)单独与联合对人肝癌SMMC-7721细胞分别作用72h后，免疫组织化学方法检测CD44v6、VEGF蛋白在肝癌细胞中的表达变化，明胶酶谱分析方法检测细胞MMP-2、MMP-9的分泌情况。 结论: 1．体外的实验表明As<,2>O<,3>和Ginsenoside Rg3均可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖，并具有明显的时效一量效关系，两种药物联合具有协同抑制作用。 2．不同浓度的As<,2>O<,3>和低剂量的Ginsenoside Rg3均可抑制肝癌细胞株对基底膜的粘附作用，As<,2>O<,3>对肝癌细胞粘附能力的抑制作用具有浓度依赖，联合GinsenosideRg3可增强As<,2>O<,3>抑制效应。 3．As<,2>O<,3>和Ginsenoside Rg3均能抑制人肝癌细胞穿透基底膜以及运动的能力，两者联合作用可增强As<,2>O<,3>抑制效果。 4．As<,2>O<,3>和Ginsenoside Rg3抑制人肝癌细胞对基底膜的粘附作用可能与下调细胞粘附因子CD44v6蛋白的表达有关。其影响肿瘤细胞穿透基底膜侵袭转移能力可能通过下调明胶酶MMP-2、MMP-9的分泌以减少胞外基质的降解，从而抑制侵袭转移的能力，另外通过下调VEGF蛋白的表达抑制肿瘤血管的形成以达到抑制肝癌的侵袭转移作用。 5．本实验证明As<,2>O<,3>和Ginsenoside Rg3联合运用抗肝癌的侵袭转移具有协同作用，两者联合既体现了中西医结合抗肿瘤侵袭转移的特色与优势，同时可以减轻As<,2>O<,3>的药物毒性。因此有必要进一步进行临床试验，从而为两种药物联合推广应用于临床抗肝癌复发转移的治疗提供更加坚实可靠的实验基础与临床依据，为肝癌抗侵袭转移的治疗探索出一条新途径。