杨树维管系统形态建成及分化相关LRR-RLK基因的启动子分析

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富含亮氨酸重复序列的类受体蛋白激酶(Leucine-rich repeat receptor-like protein kinase,LRR-RLKs)家族是植物受体蛋白激酶家族中最大的一个分支,该基因家族成员广泛参与植物萌发、生长、器官形成、果实发育、成熟、激素响应、抗病和逆境胁迫防御信号转导过程。  本文首先结合生物信息学手段对杨树全部富含亮氨酸受体蛋白激酶家族成员进行了表达谱绘制并得到了12个在发育木质部、维管形成层、韧皮部特异性表达的基因;随后利用农杆菌介导的遗传转化把相应基因的启动子-GUS融合表达载体转入野生型杨树INRA7171-B4,每个基因均获得ProLRR-RLK::GUS阳性转化子10个左右。对移栽8周的转化植株进行GUS组织化学染色,以检测GUS活性、观察蛋白的细胞定位;本文还利用基因特异性引物,通过实时定量PCR对这些基因在野生型杨树INRA7171-B4不同维管组织中的表达进行了定量分析。  结合以上两种表达验证手段,最终在杨树全基因组水平上分离出了在木质部和维管形成层特异性表达的启动子3个(3、6和17号),其余启动子在韧皮部、形成层和木质部均有不同程度的表达,并总结出在维管组织表达量最高的2个启动子7号、11号。本文为木本模式植物维管发育相关的转基因研究提供了有力的理论依据,对生物信息学相关基因表达数据库做了重要补充和修订。
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