小儿急性B淋巴细胞白血病微小残留病的实时定量研究

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目的:为了提高急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的存活率,改善患儿的生活质量,治疗需要个体化.微小残留病(MRD)的定量研究有助于实现个体化治疗.该文率先在国内以免疫球蛋白重链(IgH)基因重排作为ALL的肿瘤标志,应用实时定量聚合酶链法(RQ-PCR),采用胚系探针策略,定量检测了B细胞ALL(B-ALL)患儿的MRD,并对此法的临床适用性及临床意义进行了研究.方法:(1)用IgH重排基因的公共引物采用常规PCR法筛选克隆性重排的ALL初治标本;(2)对单克隆性IgH重排基因序列进行序列分析;(3)针对V-D或D-J连接区用Primer Express软件设计合成等位基因特异性寡核苷酸(ASO)上游引物;(4)系列稀释初治标本制作患儿特异性的标准曲线;(5)RQ-PCR法追踪检测患儿化疗过程中五个时间点的随访期标本MRD,以白蛋白基因做内参校正模板DNA的数量和质量.
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