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拟轮生镰孢(Fusarium verticillioides)是玉米穗腐病的主要致病菌之一,不仅造成玉米严重的产量损失,而且产生的伏马毒素污染玉米及其制品,给人畜健康造成重大威胁。本文分析了河北省和山东省玉米籽粒中镰孢菌的群体组成,研究了我国拟轮生镰孢的遗传多样性、产毒能力和致病力分化,同时测定不同拟轮生镰孢菌株对苯醚甲环唑的敏感性,主要研究结果如下: 1.玉米籽粒中的镰孢菌种群的分离和鉴定。结合形态学和分子生物学的方法,对2013~2014年来自河北和山东省的186份玉米籽粒样本进行了分离,共分离出7种镰孢属和8种非镰孢属真菌。从河北省样本中分离到拟轮生镰孢(F.verticillioides)、层出镰孢(F.proliferatum)、禾谷镰孢(F.graminearum)、胶孢镰孢(F.subglutinans)、泡状镰孢(F.bullatum),山东省除分离到上述镰孢菌外,还分离到了6株木贼镰孢(F.equiseti)和1株半裸镰孢(F.incarnatum)。其中拟轮生镰孢为河北省和山东省的优势镰孢菌,其次为层出镰孢和禾谷镰孢。两地的镰孢菌分离频率均表现为2013年高于2014年,整体分离频率分别为35.3%和36.7%。 2.拟轮生镰孢遗传多样性分析。采用ISSR(Inter simple sequence repeats)技术分析了171株来自我国8个地区的拟轮生镰孢的遗传多样性。利用筛选出的20条ISSR引物进行扩增,共获得327条条带,其中多态性条带317条,分子量在200 bp~5000 bp之间,平均每条引物可扩增出16.4条条带,表明我国玉米拟轮生镰孢群体存在着丰富的遗传多样性。聚类分析表明,相同地区和相同年份的菌株更趋向于聚类到一起,表明拟轮生镰孢的遗传多样性与地理来源和采集年份存在一定关系。 3.拟轮生镰孢产毒能力与致病力分化。采用田间接种和高效液相色谱的方法测定了76株拟轮生镰孢的产毒能力和致病性。结果发现,产毒量最高和最低的菌株相差188倍,分别来自内蒙古和河南;病情指数相差4.3倍,致病性最强的菌株来自东北,最弱的菌株来自山东,说明菌株间产毒能力和致病力存在差异。显著性分析表明各地区菌株的产毒能力存在明显的差异性,东北、河北和云南地区菌株致病力存在显著差异,其它6个地区菌株致病力差异不显著。 4.拟轮生镰孢对苯醚甲环唑敏感性测定。测定的157株拟轮生镰孢的EC50分布在0.0192~0.4617μg/mL之间,最高值和最低值相差24倍,表明不同的拟轮生镰孢菌株对苯醚甲环唑的敏感性存在一定差异。河南省平均EC50值最低,内蒙古平均EC50值最高,不同地区的菌株敏感性存在一定差异。拟轮生镰孢对苯醚甲环唑的敏感性频率分布呈连续的单峰曲线,经检测符合正态分布,因此将EC50的平均值0.1820±0.0967μg/mL作为拟轮生镰孢对苯醚甲环唑的敏感基线。