草果生理活性成分萃取及功能性研究初步探讨

来源 :哈尔滨商业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czronick
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为开发姜科植物草果的新的功能性及用途和有效利用草果资源,首先,用通常水蒸汽蒸馏法提取果实挥发性成分获得精油,并用GC-MS进行成分分析,用保留指数RI(Retential Indeced)法与匹配度对照解析法分别对草果精油进行解析,比较其成分差异。并与本研究室以往采用的Clevenger法萃取法进行了比较。通常水蒸气蒸馏法以1.12%平均得油率获得草果精油,主要成分为1,8-桉树脑(41.433%),αα-水芹烯(7.882%),2-异丙基苯甲醛(5.930%),香叶醇(4.847%),(E)-柠檬醛(4.322%)。Clevenger法以1.87%平均得油率获得草果精油,主要成分为1,8-核树脑(40.891%),αα-水芹烯(9.769%),2-异丙基苯甲醛(6.988%),(E)-柠檬醛(4.949%),αα-蒎烯(4.360%),(E)-2-癸烯醛(3.908%),(Z)-柠檬醛(3.684%),β-蒎烯(3.073%),这八种成分占77.622%。而Clevenger法是以1.87%平均产率得到的草果精油主要成分为1,8-桉树脑(40.891%),但是,用GC面积外标法分析了Clevenger法获得的草果精油中桉树脑质量分数为48.03%。对两种萃取方法获得的草果精油进行了清除DPPH自由基活性和清除NaN02作用的研究,结果表明:可见比色法测定两种方法获得的草果精油清除DPPH自由基的结果表明,DPPH自由基的清除率随着草果浓度的增加而增加,达到一定程度后趋于稳定。DPPH自由基的最大清除率分别为BHT(94.95%)> Vc (91.88%)>草果精油(80.00%水蒸气蒸馏法))草果精油(75.81%Clevenger法))1,8-桉树脑(4.95%),对应的浓度均为10mg/mL。两种萃取方法获得的精汕清除NaNO2作用的研究结果表明:NaNO2作用随着草果精油浓度的增加而增大。Clevenger法获得精油(68.88%)>Vc (64.54%)>BHT(52.99%)>水蒸汽蒸馏-乙醚萃取法获得精油(45.58%)。对获得精油后的草果残渣中的非挥发性成分萃取物进行了萃取和功能性研究。首先用60%乙醇水溶液对草果残渣进行萃取,利用减压浓缩将萃取液中的乙醇抽卅后进行过滤分离,不溶物用分别CHCl3、EtOAc、Me2CO和MeOH进行萃取得到萃取液。滤液分成A,B,C三部分,A和B用EtOAc、CHCl3和n-BuOH按照不同的萃取顺序进行分配苹取,最终得到CHCl3-A、EtOAc-A、n-BuOH-A,CHC13-B、n-BuOH-B、EtOAc-B萃取液。各萃取液利用减压浓缩将各部分的溶剂除去后,再利用甲醇将各部分萃取相配置成一定浓度的溶液(0.015g/mL)。并对各种萃取物的功能性进行测定。其中包括抗氧化性(对DPPH的消除作用),抑制脂肪酶活性,抑制黄嘌岭氧化酶活性,抗菌性等各种生理功能。对草果非挥发性成分研究结果表明:(1)抗氧化性结果如下:各萃取相(萃取物浓度为0.015g/mL)对DPPH自由基清除率大小顺序为:n-BuOH-A>水相-B>CHCl3-B>EtOAc-A>固体相>水相-C>TBHQ>CHCl3-A>EtOAc-B>水相-A>n-BuOH-B。(2)抑制脂肪酶结果如下:各萃取相(萃取物浓度为0.015g/mL)对脂肪酶抑制情况来看,n-BuOH-B (15.94%)>n-BuOH-A(8.34%)>CHC13-B(7.85%)>水相-C(6.67%)>固体相(5.09%)>CHC13-A(4.46%)。其他各项均无抑制脂肪酶能力。(3)抑制黄嘌呤氧化酶结果如下:各萃取相(萃取物浓度为0.015g/mL)对黄嘌呤氧化酶酶抑制情况来看,水相-C(75.00%)>水相-B(54.86%)>CHCl3-B(19.44%)。其他各相对黄嘌呤氧化酶均无抑制作用。(4)抗菌性结果如下:对于大肠杆菌:CHCl3-A(17.27mm)>CHCl3-B(15.16mm)>EtOAc-A (13.92mm)>EtOAc-B(13.26mm)>固体相(13.04mm)>0.15g/mL青霉素钠(10.64mm)>n-BuOH-B(10.09mm)>n-BuOH-A(无抑菌圈)。对于白色葡萄球菌:0.15g/mL青霉素钠(70.93mm)>0.015g/mL青霉素钠(61.66mm)>0.0015g/mL青霉素钠(55.06mm)>CHC13-B (18.29mm)>CHC13-A(16.72mm)>固体相(16.44mm)>EtOAc-B (13.93mm)>EtOAc-A (12.46mm)> n-BuOH-A (10.94mm)>n-BuOH-B (10.17mm)。对于枯草芽孢杆菌:0.15g/mL青霉素钠(69.96mm)>0.015g/mL青霉素钠(55.80mm)>0.0015g/mL青霉素钠(46.37mm)>EtOAc-B (12.62mm)>n-BuOH-A (12.60mm)>EtOAc-A (11.39mm)>固体相(9.67mm)>n-BuOH-B (12.62mm)。
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