猫细小病毒延吉株的分离鉴定及分子流行病学调查

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猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)属于细小病毒科,可引起猫细小病毒病(Feline parvovirus disease)即一种猫和猫科动物常见的高度接触性、急性传染病,发病率、死亡率均较高,临床表现主要为呕吐、腹泻,分泌物常伴有特殊的刺激性气味,机体内白细胞数量急剧减少,多器官多系统均出现损伤,严重危害猫及猫科动物的健康。由于感染FPV后缺少十分有效的治疗方法,并且在治愈后仍有可能留有后遗症,所以目前主要以预防为主,提前接种疫苗,近年来由于FPV突变情况,造成疫苗效力减弱或失效的情况时有发生。由于延吉市地处吉林省边境,与周边国家的交流比较密切,并且现在尚未有对延吉市内FPV分子流行病学的调查与研究,因此分离本地病毒株,采取快速、有针对性的措施,对猫细小病毒病的预防和治疗具有重要意义。本研究将分离延吉株FPV,分析该分离株VP2全基因序列突变情况,同时对延吉市感染FPV的猫进行分子流行病学调查,了解当前延吉市内FPV的流行趋势和状态,为后续的深入研究延边州乃至东北地区FPV的流行情况及猫细小病毒病的防治工作提供一定的数据保障和理论基础。延吉株FPV的分离鉴定。采集延吉市动物医院1例疑似感染FPV临床样本,经PCR初步鉴定为FPV阳性,提取病毒液接种至F81细胞盲传至第5代,培养48 h后出现明显的细胞病变(CPE)现象,电镜下可见典型FPV病毒粒子,直径约20-24 nm,病毒滴度TCID50为1×10-4.94/m L。扩增分离毒株VP2全基因序列,比对决定宿主范围及病毒抗原特异性的关键氨基酸位点,结果表明与FPV标准株(Gen Bank登录号:M38246)完全相符。证明成功分离到延吉市一株FPV毒株,命名为YBYJ-1株FPV(Gen Bank登录号:OM212011)。延吉市FPV分子流行病学调查。2021-2022年间在延吉市内先后采集了100例疑似感染FPV临床样本,对经PCR鉴定阳性样本进行分子克隆,测序后获得包括上述YBYJ-1株在内共27株FPV VP2全基因序列(已上传至Gen Bank),故本次调查FPV检出率为27%。分析结果表明27株FPV毒株间氨基酸同源性保持在98.3%-99.8%;与国内外各地24株参考株比对氨基酸同源性保持在95.7%-100%,可见27株FPV毒株并未发生较大突变。分析FPV遗传距离及氨基酸关键位点突变情况,结果表明延吉市内FPV流行毒株主要为G3群,少部分为G2群。本研究成功从延吉市分离出一株FPV G3群毒株,病毒滴度TCID50为1×10-4.94/m L,将其命名为YBYJ-1株FPV(Gen Bank登录号:OM212011)。对延吉市100例疑似感染FPV样本进行调查,先后共获得27株FPV VP2全基因序列,经分子流行病学调查分析显示,延吉市FPV流行情况以G3群为主。这是延吉市首次关于FPV的分子流行病学调查,这将为FPV致病机理研究以及疫苗的研发奠定基础。
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