Hsa_circ_0087293调控Wnt10b mRNA的表达促进肝细胞癌的发生发展

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背景与目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌,发病机制尚不明确,早期诊断困难,治疗受限,易出现转移与复发,预后较差。因此,寻找新的生物标志物及治疗靶点是当前的研究重点。研究发现作为HCC免疫分型中的一个亚型--免疫豁免型,主要特征是Wnt基因过表达、β-catenin富集和编码β-catenin的CTNNB1突变。调控Wnt/β-catenin通路可使该类患者从免疫治疗中获益。Circ RNAs已被证实可作为竞争内源性RNA调控Wnt/β-catenin信号通路,在癌症发生发展中发挥重要作用。一项关于索拉非尼耐药性研究中发现circ RNA-SORE(hsa_circ_0087293)充当ce RNA激活Wnt/β-catenin通路以维持索拉非尼耐药性,由于目前仅在耐索拉非尼的HCC中对hsa_circ_0087293及Wnt基因的表达有所研究,且偏向于耐药性方面,未曾探索过在初治肝癌患者中的表达情况与作用。因此,本次实验的目的在于探究hsa_circ_0087293及Wnt基因在肝细胞癌及癌旁组织中的表达水平及临床意义,为HCC的筛查、诊断及治疗提供新的方向。方法:1.Trizol法提取46例肝细胞癌组织及对应癌旁组织的总RNA2.采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)法检测其hsa_circ_0087293及Wnt10b m RNA在46例肝细胞癌组织与癌旁组织中的表达水平3.采用配对t检验分析hsa_circ_0087293及Wnt10b m RNA在肝癌及癌旁组织中表达水平的差异,采用卡方检验探讨肝细胞癌患者hsa_circ_0087293及Wnt10b m RNA表达水平与临床病理因素的关系,采用Spearman相关性分析探索hsa_circ_0087293与Wnt10b m RNA的联系,以及hsa_circ_0087293、ALBI和NLR之间的关系。使用ROC曲线评估hsa_circ_0087293与Wnt10b m RNA在临床上诊断肝细胞癌的价值结果:1.肝细胞癌组织中的hsa_circ_0087293及Wnt10b m RNA的表达水平低于癌旁组织(P<0.05)。2.hsa_circ_0087293的表达水平与肝癌患者的ALBI分级存在相关性(P<0.05),且ALBI 2级的肝癌组织中hsa_circ_0087293表达高于ALBI1级的肝癌组织,提示ALBI分级水平越高,肝功能越差,该环状RNA的表达水平越高。与门脉瘤栓、微血管入侵、淋巴结转移、BCLC分期等无明显相关性。Wnt10b m RNA的表达水平与年龄、性别、AFP、有无门脉瘤栓、微血管入侵、淋巴结转移、BCLC分期及ALBI分级等方面均无相关性。3.使用hsa_circ_0087293的表达水平(ΔCT)评估肝细胞癌的诊断价值中,ROC曲线下面积为0.727(P<0.001),最佳诊断界值(ΔCT)为13.084,敏感度为70.5%,特异度为77.3%,研究Wnt10b m RNA时,曲线下面积为0.680(P<0.05),最佳诊断界值(ΔCT)为11.121,敏感度为52.3%,特异度为90.9%。表明hsa_circ_0087293、Wnt10b m RNA对肝细胞癌的诊断均具有一定价值,尤其是hsa_circ_0087293诊断价值较高。采用Spearman相关性分析探索hsa_circ_0087293及Wnt10b m RNA之间的联系得出r=0.223,P=0.156,不具备统计学意义。在hsa_circ_0087293、ALBI与NLR之间的联系探索时发现在ALBI 2级、hsa_circ_0087293高表达的患者中,NLR值呈现高水平的患者占据绝大多数(P<0.05),但相关性分析提示三者间的联系不具备统计学意义(P>0.05)。结论:Hsa_circ_0087293、Wnt10b m RNA在肝硬化组织中表达上调,两者对肝细胞癌的诊断具有一定的价值,hsa_circ_0087293的表达水平与HCC的ALBI及NLR相关,揭示了它在HCC发生发展中的重要作用,有望通过调节Wnt10b m RNA的表达来调控慢性肝炎-肝硬化-肝癌的发生发展过程,成为一种新的生物标志物及治疗靶点,为HCC的筛查、诊断和治疗提供了新的方向。
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