线虫非编码RNA启动子序列模体的体内实验分析

来源 :中国科学院生物物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cshan225500
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非编码RNA(缩写为ncRNA)在许多细胞过程中都发挥了重要的作用。因此,描述非编码RNA启动子的转录活性对于理解非编码RNA的复杂细胞功能是非常必要的。这里,作者展示了一种用于研究线虫非编码RNA上游序列模体1-3(UMl-3)的体内转录方式的分析方法。作者验证了这三个序列模体都具有转录活性,并且确定了它们的转录起始和转录终止位点,以及在它们的上游是否存在其他调控元件。通过突变分析方法发现,每个序列模体中的不同部分对于转录的贡献是不同的。作者的实验结果显示,上游序列模体1(UM1)是可以启动绿色荧光蛋白的表达的,并且这一结果可以应用于更详尽的分析相应的非编码RNA的不同时间和空间表达模式。作者还发现,在具有UM1型启动子的非编码RNA CeN7的上游序列中,存在一个激活子。UM2和UM3不能启动绿色荧光蛋白的表达,并且终止于一段连续的胸腺嘧啶,这预示着它们是由RNA聚合酶三转录的。UM2在序列上与tRNA的启动子有相似性,并且会同相应的非编码RNA一起被转录出来,但很快会被降解掉。这种转录模式在少数植物和酵母中也被发现过,可能预示了一种在进化上非常古老的双重顺式转录模式,即tRNA作为下游snoRNA的启动子并同snoRNA一同转录。  
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