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祖国传统医学是在几千年中华文明中产生和不断发展完善的,其特色在于整体观念、辨证论治等方面,这些中医理论都建立在经络学说基础上。经络系统将人体内外、脏腑肢节联系为一个统一整体,并通过循行于经络中的气血濡养脏腑内外,因此,机体的健康状况均可通过经络及穴位表现出来。中医针灸则通过刺激相应穴位以达到恢复机体动态平衡,最终实现治疗目的。艾灸是中医疗病养生的重要方法。有些病症,尤其是在寒湿凝滞证灸法更为适宜。《灵枢·官能》中认为“针所不为,灸之所宜”。艾灸通过治疗过程中所产生的温热效应和艾叶本身的中药作用,可达到理气散寒、通经活络、活血逐痹、消瘀散结等作用。艾灸疗效受多因素影响,其中介入时机是一个重要方面。逆灸是艾灸疗法的一大特色,逆灸是相对于疾病发生发展过程而言的预先干预,包括疾病发生前干预和疾病发展过程中干预。本实验主要是研究艾灸早期干预对寒凝证类痛经大鼠子宫微循环状态及前列腺素相关受体的影响。实验目的：我们前期所做的相关实验,通过采取寒凝证结合类痛经的造模方法,成功建立寒凝证类痛经大鼠模型。在此基础上观察不同时机的艾灸干预对寒凝证类痛经大鼠子宫微循环、PGF2α受体FP、PGE2受体EP2,FP/EP2的影响,进一步探讨艾灸在寒凝痛经发生过程中早期介入治疗与痛经模型建立后单纯治疗效果的差异。实验方法：筛选处于动情间期的3月龄SD雌性大鼠64只,按照随机数字法分为4组,每组16只(8只用于实验一,测子宫微循环；另8只用于实验二,测子宫组织的FP和EP2),4组分别为：盐水组、寒凝证类痛经组、A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)。具体造模方法：寒凝证类痛经组、A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法造模,每日固定时间,经大鼠腹部皮下注射苯甲酸雌二醇,连续10天。第1天及第10天日注射0.5mg/只,第2-9天每日0.2mg/只,末次给药后1小时后,腹腔注射缩宫素2ml/只。第1-5天每日在给药后,再放入-25℃冰柜冷冻4小时,中途在2小时打开冰柜换气5秒。盐水组每日给予注射同等剂量的生理盐水,第10天注射生理盐水1小时后,在腹腔注射盐水0.2ml。艾灸不同干预方法如下：A组(造模后介入组)：第10天注射缩宫素后,灸一次,连灸3壮,即痛经模型成功建立后施灸。B组(造模中介入组)：分别于造模开始的第6天,第8天,第10天给药后,各灸一次,每次连灸3壮,三天共灸三次,其中第6、第8天在痛经模型建立过程施灸是造模中介入,第10天属于模型建立后施灸。实验结果：1.艾灸早期干预对寒凝证类痛经大鼠子宫血管管径、条数、颜色、清晰度的影响与盐水组比较,模型组在5-60min各时间点的子宫毛细血管管径显著缩小(P<0.01或P<0.05),微血管管径显著缩小(P<0.01)；毛细血管条数显著减少(P<0.01或P<0.05),微血管条数变化无统计学差异(P>0.05)；微血管清晰度显著下降(P<0.01)；微血管颜色显著增深(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,A组(造模后介入组)在5-60min各时间点的子宫毛细血管管径显著扩张(P<0.01或P<0.05),微血管管径显著扩张(P<0.01或P<0.05)；毛细血管条数显著增多(P<0.01),40-60min各时间点微血管条数显著增多(P<0.01或P<0.05)；微血管清晰度显著改善(P<0.01)；在5-20min各时间点血管颜色显著改善(P<0.01)。与模型组比较,B组(造模中介入组)在5-60 min各时间点的子宫毛细血管管径显著扩张(P<0.01),微血管管径显著扩张(P<0.01)；毛细血管条数显著增多(P<0.01)；40-60min各时间点微血管条数显著增多(P<0.01)；微血管清晰度显著改善(P<0.01或P<0.05),5-30min各时间点血管颜色显著改善(P<0.01或P<0.05)。与A组(造模后介入组)比较,B组(造模中介入组)在5-60min各时间点的子宫毛细血管、微血管管径,子宫毛细血管、微血管条数,微血管清晰度,微血管颜色均有改善,但变化均无统计学差异(P>0.05)。与模型组比较,A组(造模后介入组)在10-60min各时间点子宫毛细血管和微血管管径、微血管条数和颜色的P值要大于B组(造模中介入组),即在上述微循环指标方面相比,两个艾灸干预组疗效虽无统计学差异,但B组(造模中介入组)的疗效有优于A组(造模后介入组)的趋势。2.艾灸早期干预对寒凝证类痛经大鼠PGF2α受体FP、PGE2受体EP2,FP/EP2的影响。与盐水组对比,模型组的FP表达明显增强(P<0.01),EP2表达增强但无统计学差异,二者比值(FP/EP2)显著升高(P<0.01)。与模型组对比,A组(造模后介入组)FP表达明显减弱(P<0.01),EP2表达显著减弱(P<0.01),二者比值(FP/EP2)显著降低(P<0.01)；B组(造模中介入组)的FP表达明显减弱(P<0.01),EP2表达明显减弱(P<0.01),二者比值(FP/EP2)显著降低(P<0.01)。与A组(造模后介入组)比较,B组(造模中介入组)的FP、EP2表达减弱,二者比值(FP/EP2)降低,比值更接近正常盐水组比值,但变化无统计学差异(P>0.05)。实验结论：1.寒凝证痛经大鼠相对于正常大鼠的子宫微循环出现明显的“瘀滞”现象,表现在子宫局部组织的微血管和毛细血管的条数减少、管径变细,微血管的颜色加深和清晰度变差。同时子宫内的前列腺素相关受体表达及比值显著升高,子宫内环境出现失衡,导致大鼠整体呈现寒凝症状。2.寒凝证痛经大鼠在艾灸关元穴的作用下,子宫微循环状态明显改善,子宫的微血管和毛细血管的条数增加、管径扩大,微血管的颜色变浅,清晰度显著改善。子宫组织中前列腺素相关受体表达及比值状态得到显著改善,机体内环境恢复平衡。3.不同时机介入艾灸关元穴对痛经大鼠子宫微循环和前列腺素相关受体的改变,有一定差异。相比之下,在痛经产生过程中早期介入艾灸的效果,有优于痛经后再介入艾灸一次的趋势。