树突状细胞与上下气道炎症反应一致性研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaoxiang19931030
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目的:树突状细胞(dendritic cell,DC)最初在小鼠的脾脏中被发现,后来在人外周血液中亦发现这种细胞,它以表面有许多树枝状的不规则突起为特征。DC尤其广泛分布于包括鼻、气管等在内的整个上下气道组织,形成一个完整的气道网络监控系统,参与机体免疫耐受或是免疫应答的调节。DC是目前已知体内功能最强大的抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC),是初始型T细胞(CD4+T细胞)活化的使动者。其具有极强的摄取抗原的能力,并在摄取了抗原的同时转化成为成熟DC,在自身细胞表面表达CD80、CD86、S-100等表面标志物而作为活化初始型T细胞的第二信号。已有研究表明DC具有诱导CD4+T细胞向不同辅助性T细胞(T helper lymphocyte,Th)分化的作用,与变应性鼻炎、支气管哮喘以及鼻息肉等气道炎症性疾病的发病机制密切相关。本实验通过对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)和支气管哮喘(asthma,AS)动物模型的鼻黏膜和肺组织中CD80、CD86、IFN-γ、IL-4的表达水平进行检测,了解DC在上下气道炎症中的表达情况,及上下气道炎症反应是否具有一致性,并进一步探讨DC在上下气道炎症反应一致性中的作用和机制。方法:刘文军等在前期实验中,将6-8周SD大鼠40只,按照随机数字表法分为变应性鼻炎实验组(AR组)、支气管哮喘实验组(AS组)、变应性鼻炎对照组(AR对照组)和支气管哮喘对照组(AS对照组),共四组,每组10只,其中AR实验组以及AS实验组用卵清蛋白加上氢氧化铝致敏分别制成 AR和AS大鼠模型,对照组则相对的使用生理盐水和氢氧化铝进行造模,在造模同时对每只大鼠进行行为学观察。判断造模成功以后将动物处死,取出鼻黏膜和完整的肺组织迅速固定。本实验的实验标本来源于刘文军实验所造动物模型鼻黏膜和肺组织,同样分为AR、AS实验组以及AR、AS对照组四组,将蜡块制成厚5μm切片,采用免疫组织化学技术(链霉素亲和素生物素法,SABC法),对鼻黏膜和肺组织中的CD80、CD86、IFN-γ、IL-4的表达进行检测。在显微镜下观察鼻黏膜及肺组织中CD80、CD86、IFN-γ、IL-4的表达情况,计数鼻黏膜和肺组织中阳性细胞数,分析DC的表达及其与上下气道炎症反应的关系。采用SPSS16.0软件对数据进行统计学分析。结果:1、CD80表达情况:⑴CD80阳性表达数在 AR实验组鼻黏膜中为(23.94±4.90)个,在AR对照组鼻黏膜中为(2.24±0.45)个;在AR实验组肺组织为(25.62±4.02)个,在AR对照组肺组织中为(2.38±0.58)个,AR实验组中CD80阳性细胞数明显多于对照组,t值分别为13.943和18.075,P值均<0.05,统计学有差异;⑵CD80阳性细胞数在AS实验组鼻黏膜中为(21.90±3.05)个,在AS对照组鼻黏膜中为(2.16±0.87)个;在AS实验组肺组织中为(25.02±3.48)个,在AS对照组肺组织中(2.54±0.86)个,AS实验组中CD80细胞数较明显多于对照组,t值分别为19.661和19.846,P值均<0.05,统计学有差异。2、CD86表达情况:⑴CD86阳性表达数在AR实验组鼻黏膜中为(24.42±4.67)个,在AR对照组鼻黏膜中为(2.06±0.53)个;在AR对照组肺组织中为(2.04±0.73)个, AR实验组肺组织中为(22.94±4.34)个,AR实验组中CD86阳性细胞数明显多于对照组,t值分别为15.049、15.004,P值均<0.05,统计学有差异;⑵CD86阳性表达数在AS实验组鼻黏膜中为(22.42±3.70)个,在AS对照组鼻黏膜中为(1.90±0.54)个;在 AS实验组肺组织中为(25.10±4.58)个,在AS对照组肺组织中为(2.14±0.35)个,AS实验组中CD86阳性细胞数明显多于对照组,t值分别为17.377和15.808,P值均<0.05,统计学有差异。3、IL-4表达情况:⑴IL-4阳性表达数在 AR实验组鼻黏膜中为(141.14±10.73)个,在 AR对照组鼻黏膜中为(34.96±4.80)个;在 AR实验组肺组织中为(138.46±12.31)个,在 AR对照组肺组织中为(36.86±5.18)个,在AR实验组中IL-4阳性细胞数明显多于对照组,t值分别为28.570和24.065,P值均<0.05,统计学有差异;⑵IL-4阳性表达在AS实验组鼻黏膜中为(139.60±10.50)个,在 AS对照组中鼻黏膜中为(34.38±5.13)个;在 AS实验组肺组织中为(139.24±10.45)个,在 AS对照组肺组织中为(34.10±4.73)个,AS实验组中IL-4阳性表达明显多于对照组,t值分别为28.468和28.980,P值均<0.05,统计学有差异。4、IFN-γ表达情况:⑴IFN-γ阳性表达数在AR实验组鼻黏膜中为(2.96±0.34)个,在AR对照组鼻黏膜中为(32.62±4.33)个;在实验组肺组织中为(2.78±0.33)个,在AR对照组肺组织中为(35.46±5.59)个,在AR对照组中IFN-γ的阳性细胞数多于实验组,t值分别为21.585和18.440,P值均<0.05,统计学有差异;⑵IFN-γ阳性表达数在AS实验组鼻黏膜中为(2.58±0.52)个,在AS对照组鼻黏膜中为(35.24±4.02)个;AS实验组肺组织中为(2.66±0.42)个,在AS对照组肺组织中为(37.54±4.33)个,AS对照组中IFN-γ的阳性细胞数多于实验组,t值分别为25.474和25.354,P值均<0.05,统计学有差异。5、CD80、CD86在上下气道炎症中的相关性分析:⑴CD80在AR实验组鼻黏膜中与在肺组织中的表达呈正相关(r值为0.729,P值为0.022),在AS实验组鼻黏膜中与在肺组织中的表达呈正相关(r值为0.639, P值为0.047);⑵CD86在AR实验组鼻黏膜中与在肺组织中的表达呈正相关(r值为0.870,P值为0.001),在AS实验组鼻黏膜中与在肺组织中的表达呈正相关(r值为0.795,P值为0.006)。6、CD80、CD86与IL-4的相关性分析:⑴AR实验组鼻黏膜和肺组织中CD80的表达分别与IL-4呈正相关(r值分为0.755、0.840,P值分别为0.012、0.002);⑵AS实验组中鼻黏膜和肺组织中CD80的表达分别与IL-4呈正相关(r值分为0.849、0.859,P值分别为0.002、0.001);⑶AR实验组鼻黏膜和肺组织中CD86的表达分别与IL-4呈正相关(r值分为0.887、0.673,P值分别为0.001、0.033);⑷AS实验组鼻黏膜和肺组织中CD86的表达分别与IL-4呈正相关(r值分为0.652、0.729, P值分别为0.041、0.017)。7、CD80、CD86与IFN-γ相关性分析:⑴AR实验组鼻黏膜和肺组织中CD80的表达分别与IFN-γ呈负相关(r值分为-0.832、-0.893,P值分别为0.003、0.001);⑵AS实验组中鼻黏膜和肺组织中CD80的表达分别与IFN-γ呈负相关(r值分为-0.765、-0.734,P值分别为0.010、0.016);⑶CD86的表达分别与 IFN-γ呈负相关(r值分为-0.804、-0.656,P值分别为0.005、0.039);⑷CD86的表达分别与IFN-γ呈负相关(r值分为-0.816、-0.790,P值分别为0.004、0.007)。结论:1、成熟DC的表面标志物CD80、CD86在变应性鼻炎和哮喘中高表达,表明了DC参与气道炎症的发病;2、做为Th2型细胞因子的IL-4在变应性鼻炎和哮喘鼻黏膜和肺组织中高表达,参与了变应性鼻炎和哮喘的发病;3、做为Th1型细胞因子的IFN-γ在变应性鼻炎和哮喘鼻黏膜和肺组织中的低表达可能与两者发病有关;4、CD80在上下气道炎症中的表达具有相关性,CD86在上下气道炎症中的表达同样具有相关性,从DC的角度表明了上下气道具有相关性,同时也说明了DC与上下气道炎症反应一致性具有相关性;5、上下气道炎症反应的发生可能与Th1/Th2细胞表达失衡有关。
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