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鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳球虫(Eimeria)引起的一种严重危害养禽业发展的寄生原虫病。传统的药物防制方法存在耐药性、药物残留等问题。而DNA疫苗具有保存时间长,不涉及致病核酸序列,能诱导机体产生全面的免疫应答等优点。因而鸡球虫DNA疫苗的研究受到众多研究者的关注,并获得了很多对球虫具有保护性的抗原基因。本实验室已从柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)、毒害艾美耳球虫(E. necatrix)和堆型艾美耳球虫(E. acervulina)孢子化卵囊分别克隆得到免疫保护性抗原基因TA4、NA4和3-1E,并利用DNA重组技术成功构建了免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-γ、pVAX1.0-NA4-IL-2和pVAX1.0-3-1E-IFN-γ,且试验表明这三种DNA疫苗对本种球虫感染均具有较好的免疫保护作用。同时也已从巨型艾美耳球虫(E. maxima)孢子化卵囊中克隆得到免疫保护性抗原基因EmTFP250的全长8个片段,并用DNA重组技术将各片段的pcDNA4.0连接成免疫调节型DNA疫苗,并证明各片段对巨型艾美耳球虫都具有一定的免疫保护作用。本实验利用其中Em8片段构建了免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2.将E. tenella免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-γ经腿部肌肉分别于14、21日龄两次免疫雏鸡,28日龄经口接种新鲜的E. tenella、E. maxima、E. necatrix和E,acervulina孢子化卵囊5×104个/羽、10×104个/羽、5×104个/羽和10×104个/羽。7日后宰杀全部实验动物,分别作增重、存活率、肠道病变计分、肠道卵囊计数指标测定,以抗球虫指数(ACI)综合判定其综合免疫交叉保护性。结果表明,E. tenella DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-γ对E. maxima和E. acervulina感染有部分交叉免疫保护作用,对感染E. necatrix没有交叉免疫保护作用。用上述同样的方法将E. maxima免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2对E.tenella、E. necatrix和E. acervulina感染的交叉免疫保护行进行了研究。结果表明,E.maxima DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2对E. tenella感染有部分交叉免疫保护作用,对感染E. necatrix和E. acervulina没有交叉免疫保护作用。用上述同样的方法将E. necatrix免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2对E.tenella、E. maxima和E. acervulina感染的交叉免疫保护行进行了研究。结果表明,E.necatrix DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2对E. tenella、E. maxima和E. acervulina感染有部分交叉免疫保护作用。用上述同样的方法将E. acervulina免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IFN-γ对E. tenella、E. maxima和E. necatrix感染的交叉免疫保护行进行了研究。结果表明,堆E. acervulina DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IFN-γ对E. tenella、E. maxima和具有部分交叉免疫保护作用,而对E. necatrix没有交叉免疫保护作用。用上述同样的方法将E. tenella免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-γ、E. maxima免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2、E. necatrix免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2. acervulina免疫调节型DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IFN-y以1:1：1:1混合后对E. tenella、E. maxima、E. necatrix和E. acervulina感染的免疫保护行进行了研究。结果表明,4种艾美耳球虫混合DNA疫苗对E. tenella、E. maxima和E.necatrix具有部分免疫保护作用。