论文部分内容阅读
胰腺癌是恶性程度很高的肿瘤。由于其早期症状隐匿,临床表现缺乏特异性,早期诊断十分困难,确诊时多已失去了根治性手术的机会,80%的胰腺癌不能手术切除。虽然传统的放疗、化疗能使胰腺癌肿瘤体积缩小,但大部分肿瘤经过一段时间后又出现转移和复发,绝大多数死于肿瘤的侵袭和转移,故阻止肿瘤转移是生存的关键。目的：探讨负压效应作用于人胰腺癌SW1990细胞株后,细胞侵袭转移能力的改变。实验方法：常规培养人胰腺癌SW1990细胞株,建立负压培养模型。设对照组(压力为0),低负压组(压力为-300mmHg,1h/次,2bid)和高负压组(压力为-600MmHg,1h/次,2bid)。负压干预3天。倒置显微镜观察细胞生长状况,采用CCK-8法检测细胞活性,绘制细胞的生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。利用transwe11小室检测细胞侵袭能力的变化,实时定量PCR检测MMP-2mRNA和MMP-9mRNA的表达。结果：倒置显微镜下观察：对照组细胞生长良好,为梭形或多角形并且融合形成集落。实验组观察可见细胞生长缓慢,细胞变形,随着压力的增加和时间延长,细胞变圆、皱缩、漂浮、碎裂、死亡逐渐增加。CCK-8检测细胞活性：第四天高负压组0.D值为2.15±0.05,低负压组的0.D值为2.86±0.04,对照组的0.D值为3.28±0.0,4,各组间差异均有显著统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测细胞凋亡：高负压组细胞凋亡率为15.22%±0.81%,低负压组细胞凋亡率为2.31%±0.06%,对照组的细胞凋亡率为1.91%±0.13%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell小室法检测细胞迁移：在200倍镜下平均每视野下迁移细胞数：高负压组为11.07±3.01,低负压组为18.93±3.67,对照组为53.60±4.14,各组间差异均有显著统计学意义((P<0.01)。各组细胞实时定量PCR测定结果：与对照组的MMP-2mRNA水平比较,低负压组的MMP-2mRNA水平为对照组的0.1169±0.0030倍,高负压组的MMP-2mRNA水平为对照组的0.0605±0.0054倍,差异有显著统计学意义(P<0.01)；与对照组的MMP-9mRNA水平比较,低负压组的MMP-9mRNA水平为0.2182±0.0230倍,高负压组的MMP-9mRNA水平为0.1124±0.0102倍,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论负压效应能显著抑制胰腺癌SW1990细胞活性,增加细胞凋亡；负压效应还可明显抑制胰腺癌SW1990细胞的运动、侵袭及转移能力,对下一步进行临床研究提供佐证。