葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏的分子基础是G6PD基因突变,它是一种X连锁的不完全显性遗传病,也是发生频率最高的遗传性疾病之一.G6PD基因突变具有明显的地域和人种差异,如:G6PD基因中G1376T、G1388A和A95G突变就是中华民族所独有的突变型,也是中国人中最为常见的突变类型.G6PD是磷酸戊糖途径的限速酶,机体依赖该途径提供主要的还原当量NADPH,而NADPH又作为生物体内许多重要酶作用的辅基,参与氧化-还原、生物合成、生物解毒及细胞分化等,故G6PD基因突变必然产生连琐病理反应,导致许多临床相关疾病.此外,最新研究还显示,G6PD也参与了肿瘤的形成,可能作为参与肿瘤发生的一个候选基因.我们认为G6PD在细胞癌变和转化的分子机制中有着特殊的表现,可能作为这些细胞的特征在肿瘤的实验诊断中具有潜在价值.该论文共分三部分分别研究如下:一、中国常见的G6PD基因突变型分析及特异性诊断技术的建立该部分研究是基于荧光共振能量转移的原理,在LightCycler荧光定量PCR仪上进行的.我们首先设计了一对检测G6PD基因A95G突变的荧光杂交探针,在熔解曲线模式下,设定不同模板量、Mg<2+>浓度,观察熔解曲线峰面积及Tm值的变化.二、G6PD基因突变与血细胞功能异常 鉴于G6PD的重要生理功能,G6PD基因突变势必导致细胞的功能异常,此部分我们对G6PD缺乏患者的红细胞、白细胞部分功能改变进行了研究.三、G6PD对肿瘤细胞增殖、分化及抗氧化能力的影响 我们在体外培养Raii细胞,分别用不同浓度的去氢表雄酮处理细胞,观察细胞G6PD活性被抑制的情况及由此导致的细胞存活、增殖能力改变;检测Raji细胞分别在G6PD活性被抑制及不抑制的情况下受PMS剌激前后不同时间点细胞内G6PD、GR、GPX活性及GSH水平,籍此评估G6PD对肿瘤细胞存活、增殖、抗氧化调节的作用.