疟疾是世界上危害严重的三大传染病之一。红内期疟原虫感染是导致患者出现临床症状甚至死亡的主要原因。阐明宿主控制红内期疟原虫免疫效应机制对于控制红内期疟原虫感染,进而减轻疟疾临床症状具有十分重要的意义。已知疟原虫特异性CD4+T细胞、抗体和CD8+T细胞可以有效控制红内期疟原虫。然而,研究发现疟原虫表面重要抗原往往存在多态性,如var、rif和stevor,疟原虫通过表达不同的抗原种类从而成功地逃避宿主的免疫攻击,进而导致频繁再燃。疟疾反复再燃会导致患者呈现慢性感染的状态。疟疾慢性感染患者在临床上往往并不出现症状,表现为临床免疫,但体内仍存低水平疟原虫感染,是疟疾传播的重要传染源。因此,深入探讨机体控制疟疾再燃机制,对于控制疟疾的慢性感染、阻断疟疾传播乃至消除疟疾均具有重要意义。夏氏疟原虫（P.chabaudi）急性感染后常伴随反复再燃,进而导致可达2-3个月以上的持续慢性感染,因此是目前公认的研究疟疾再燃及慢性感染的鼠疟模型。为此,我们采用P.chabaudi感染模型,利用单细胞转录组测序系统探讨P.chabaudi感染后,其急性和再燃期宿主体内免疫细胞活性的动态变化,并对P.chabaudi再燃及慢性感染的发生机制进行了初步探讨。一.单细胞转录组测序揭示了夏氏疟原虫感染急性期和再燃期免疫细胞的动态变化UMAP分析显示,在P.chabaudi感染急性期和再燃期,宿主适应性和固有免疫细胞频率均有显著变化。二.适应性免疫应答在宿主控制夏氏疟原虫急性期和再燃期的作用1、与急性期相比,CD4+T细胞在宿主控制P.chabaudi再燃期的作用显著降低UMAP分析显示,与P.chabaudi感染急性期相比,再燃期CD4+T细胞不同亚群的频率均发生明显变化。体内耗竭CD4+T细胞后发现,CD4+T细胞在急性期比再燃期发挥更重要的免疫保护作用。2、B细胞介导的体液免疫在P.chabaudi感染急性期和再燃期发挥不同作用UMAP分析显示,B细胞不同亚群的频率随着P.chabaudi感染进程均发生明显变化。使用B细胞缺失（μMT）小鼠以及抗体耗竭再燃期小鼠B细胞,发现B细胞在控制P.chabaudi感染急性期作用关键,而在再燃期不发挥作用。3、CD8+T细胞在P.chabaudi感染急性和再燃期均无显著影响UMAP分析显示,CD8+T细胞不同亚群的频率随着P.chabaudi感染进程均发生明显变化。CD8+T细胞在急性期和再燃期体内耗竭后,对宿主疟原虫血症均无显著影响。因此,CD8+T细胞在宿主控制P.chabaudi急性期和再燃期没有显著作用。三.固有免疫细胞在宿主控制夏氏疟原虫再燃中发挥重要作用UMAP分析显示,与急性期相比,γδT细胞、红髓巨噬细胞（RPMs）、树突状细胞（DCs）和中性粒细胞在再燃期的频率明显增加。有研究表明,γδT细胞在宿主控制疟疾再燃中发挥重要作用,提示固有免疫细胞在宿主控制夏氏疟原虫再燃中可能作用关键。为此我们进一步观察频率增高的固有免疫细胞在宿主控制夏氏疟原虫再燃中的作用。采用高剂量能耗竭脾脏大部分吞噬细胞的氯磷酸脂质体（Clodronate Liposomes,CLs）处理感染小鼠,发现小鼠脾脏大部分RPMs和单核细胞被去除,且再燃期的原虫血症急剧升高,所有感染小鼠均死亡。为了进一步观察高剂量CLs的靶向效应细胞,我们采用低剂量CLs特异性去除边缘区巨噬细胞（MZMs）和嗜金属巨噬细胞（MMMs）,观察其对宿主免疫保护的影响。结果发现,低剂量CLs同样能使再燃期的疟原虫血症急剧升高。进一步研究发现,NCMs是CLs靶向耗竭的效应细胞。对单细胞转录组测序中单核/巨噬细胞进行聚类分析,发现NCMs在急性期频率几乎降为0,而在再燃期又显著增加,提示在P.chabaudi感染再燃期,疟原虫可能通过调节NCMs活性,增强其迁移至脾脏及发挥免疫效应能力,进而增强宿主免疫保护。综上,在宿主控制疟疾再燃期,适应性免疫效应受到抑制,而固有免疫细胞则发挥重要免疫保护作用。这一发现可为制定针对疟疾慢性感染的免疫干预提供新的线索。