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目的: mTORC1(mammalian target of rapamycin complex1)是mTOR在机体中存在的两种蛋白复合物的一种存在方式,并且对雷帕霉素敏感。mTORC1作为一种重要的生长代谢调控因子,参与调控细胞生长、细胞凋亡、细胞增殖(细胞分裂)、基因转录、蛋白质合成等生物过程。Raptor是mTORC1重要的支架和调节蛋白,且逐渐发现Raptor具有独立于mTORC1的功能。肠道可能直接遭遇到各种各样的病原菌的入侵,其主要就依靠一些肠相关淋巴组织(GALT)来识别与清除入侵的外源病原菌并且调节与维持肠道中正常共生菌的稳定与功能。但Raptor对于肠道T淋巴细胞的影响目前还没有相关研究。 方法: 在本文中我们研究在Raptor缺失的情况下,分别比较正常野生小鼠(wild type mice)和Raptorf/fCD4Cre小鼠(该小鼠的T淋巴细胞中特异性表达缺失Raptor)的小鼠肠黏膜固有层T淋巴细胞(肠相关淋巴组织的一种效应细胞)的变化,包括对小鼠肠黏膜固有层中TCRαβ+T淋巴细胞的细胞数目及所占肠黏膜固有层中所有活细胞的细胞百分比例,所有TCRαβ+T淋巴细胞中相应的CD4阳性及CD8阳性的细胞亚群的细胞数目以及其相应的分化比例,还有在CD4阳性和CD8阳性的不同的细胞亚群中关于CD44和CD62L的不同表达差异;另外还把来自正常小鼠和Raptorf/fERCre小鼠中的thy1阳性的细胞混合,通过眼眶后静脉注射的方式共同过继性转移到Rag2-/-小鼠体内,进行与在Raptorf/fCD4Cre小鼠体内相同的研究,即Rag2-/-小鼠体内分别来自正常小鼠和Raptorf/fERCre小鼠的TCRαβ+T淋巴细胞所占比例变化,TCRαβ+T淋巴细胞中相应的CD4阳性和CD8阳性的细胞亚群所占比例的区别。而且还在小鼠长黏膜固有层T淋巴细胞的存活和增殖方面也进行了相关研究。最后,我们还探究了在感染状态下,正常小鼠和Raptorf/fCD4Cre小鼠在C.rodentium菌感染后的生理变化,对C.rodentium菌的清除情况,以及在感染后小鼠长黏膜固有层T淋巴细胞中细胞数目及相关亚群的分化情况。 结果: 研究表明不管是在分别的正常野生小鼠与Raptorf/fCD4Cre小鼠的比较,还是在Rag2-/-受体小鼠体内,在用Tamoxifen诱导前与Tamoxifen诱导后,分别来自正常小鼠和Raptorf/f ERCre小鼠的TCRαβ+T淋巴细胞所占细胞百分比例变化,以及其相关亚群细胞的分化情况比较,Raptor缺失可以导致小鼠肠黏膜固有层TCRαβ+T淋巴细胞的细胞数目以及所占百分比例都明显降低,而且其中CD8阳性的TCRαβ+T淋巴细胞细胞百分数减少,相应的CD4阳性的TCRαβ+T淋巴细胞细胞百分数升高,但是这种升高也并没有恢复其CD4阳性的TCRαβ+T淋巴细胞细胞数目的降低。而且Raptor缺失的长黏膜固有层TCRαβ+T淋巴细胞的减少是由或最起码部分是由其增殖受损造成的,而与其肠黏膜固有层T淋巴细胞的存活没有影响。另外,在C.rodentium菌感染后,与正常的对照小鼠比较,虽然Raptorf/f CD4Cre小鼠的体重没有明显的差异,但是可以在感染后的Raptorf/fCD4Cre小鼠的肝脏和脾脏中可以检测到大量的C.rodentium菌残留,即Raptor缺失使小鼠对C.rodentium菌的清除功能受损。而且在感染状态下,Raptorf/fCD4Cre小鼠也同样表现出肠黏膜固有层TCRαβ+T淋巴细胞的细胞数目和所占细胞百分比例都下降,TCRαβ+T淋巴细胞中CD8阳性的细胞亚群所占比例下降,CD4阳性细胞亚群所占比例升高,但是两者的细胞数目都减少,而且不同的细胞亚群中初始细胞和中央记忆细胞所占的比例有所升高,而效应记忆T细胞所占的比例有所下降。 结论: Raptor在小鼠肠黏膜固有层TCRαβ+T淋巴细胞的增殖和进一步的功能分化过程中起着重要的作用,而且在Raptor缺失的情况下,导致小鼠肠道对外源菌感染的清除功能受损。