翦股颖PenA-4中AsEXP1基因启动子的克隆和功能分析

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干旱是影响植物生长的重要因素,在干旱胁迫条件下,植物新陈代谢发生变化,生理活动受到阻碍,生长发育各阶段受到影响,植物出现萎蔫现象,通过基因工程改良物种对干旱的耐受性是解决这一问题的有效方法。AsEXP1基因是从极端耐热型草种A. scabra中分离得到扩展蛋白基因,在高温胁迫下大量表达。扩展蛋白诱导产生能够疏松细胞壁,增加细胞伸展性,缓解对细胞壁的张力,从而增强植物抵抗高温的能力。由于扩展蛋白可通过调节细胞壁的伸展从而影响植物对逆境的适应,推测耐热基因AsEXP1的表达同样能增强植物对干旱的抵抗能力,这需要对AsEXP1基因进行深入研究。为了进一步研究AsEXP1基因的功能,本研究从翦股颖PenA-4中克隆了AsEXP1基因上游962bp的5’端调控区域,并把它与GUS基因连接转化水稻愈伤做功能分析,证明了其具有启动子活性并受高温调控。分析AsEXP1基因启动子序列,发现其包含有启动子的基本转录元件TATA box及AGGA box,在TATA box核心区域有多个受GA、ABA和干旱等调控的顺式作用元件,由此推测AsEXP1基因受GA、ABA、干旱胁迫诱导表达。另外,构建AsEXP1基因过表达载体以深入分析其功能性,为后续伸展蛋白调节植物耐受性作用机制的研究奠定基础,将胁迫环境下的草地生产力改善策略引致一新的战略方向。
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