本文制备了两亲性脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖(DCMC)自聚集纳米粒(SNPs)作为疏水抗癌药物阿霉素的传递载体。带负电荷的亲水性羧甲基覆盖SNPs外壳,其在生理pH条件下可保持稳定。在微酸性的肿瘤组织细胞外液,部分羧甲基发生质子化,壳亲水性降低,可增加其对癌细胞的亲和力和细胞摄取。在细胞内酸性环境,氨基和羧基发生进一步质子化,纳米粒的核-壳结构变形,并聚集沉淀,引发药物快速释放,最终药物释放到胞浆。这样的系统是一种有效的药物传递方式,可以作为疏水抗癌药物的递送载体。本文首先以不同分子量的壳聚糖为母体聚合物,经亲水修饰制备了水溶性羧甲基壳聚糖(CMCS),进一步通过脱氧胆酸-N-琥珀酰亚胺活化酯与CMCS的氨基反应,得到两亲性脱氧胆酸修饰的羧甲基壳聚糖(DCMC)。采用FTIR、1H NMR、胶体滴定等方法对合成产物进行了表征。优化了CMCS的合成工艺。通过控制CS的分子量及DOCA-NHS与CS糖单元的比例,合成了三种不同分子量及不同DOCA取代度的两亲性聚合物。本研究合成的脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖(DCMC)在水溶液中,通过探头超声作用可形成规则近球形,分散性良好的自聚集纳米粒,粒径为87.7～174.5nm。随着疏水基团DOCA取代度增加和CS分子量降低,临界聚集浓度(CAC)降低。DCMC自聚集纳米粒具有pH敏感的聚集、沉淀和结构变形行为。以粒径为指标考察了4℃放置3个月的稳定性：随着DOCA取代度增加,CS分子量降低,DCMC纳米粒有一定稳定性增加的趋势。本研究以阿霉素作为模型药物,采用透析法制备了规则球形,分散性良好的载阿霉素脱氧胆酸-羧甲基壳聚糖自聚集纳米粒([D]NP),考察了各处方因素对载药的影响：在一定范围内,随着DOX/DCMC比例、载体浓度和DOX浓度提高,载药量和包封率增加；随DOX/DCMC比例增加,粒径增大,zeta电位绝对值则降低。随DOCA取代度和CS分子量增大,纳米粒的包封率和载药量稍有增加,而粒径则分别显著降低和增大。[D]NP在体外释药最初8h内存在一个快速释放,此后进入一个符合Higuich方程、Ritger-Peppas方程或Weibull分布的缓慢释药期：随着载药量的提高、DOCA取代度的降低、释放介质pH降低以及CS分子量增大,药物释放明显加快。[D]NP在37℃动态条件下密封避光振荡7 d,以及4℃密封避光放置3个月,稳定性良好。采用MTT法,以人乳腺癌细胞系MCF-7及人乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr为模型的体外细胞毒作用实验结果表明,三种分子量的[D]NP对MCF-7的细胞毒作用显著弱于DOX溶液,其中[D]NP-600 kDa的作用明显强于[D]NP-50 kDa;对于MCF-7/Adr,三种分子量的[D]NP抑制作用无显著性差异,均极显著强于DOX溶液组,表现了明显克服多药耐药的效果,且耐药逆转因子随孵育时间延长明显增大。激光共聚焦显微镜结果表明,DOX溶液与MCF-7孵育后,迅速进入细胞核；而在MCF-7/Adr,只在细胞浆出现极其微弱的荧光,随着孵育时间延长,细胞内荧光强度也没有明显增强。[D]NP在MCF-7和MCF-7/Adr的核分布均为受药物释放限制的时间依赖过程：与MCF-7孵育0.5 h后,主要分布在胞浆,随孵育时间延长,细胞核累积量逐渐增加。流式细胞术结果表明,与DOX溶液相比,[D]NP在耐药细胞MCF-7/Adr内的摄取量增多,且显著降低了外排速度,增加了细胞内药物滞留量,因而一定程度上克服了MCF-7/Adr的耐药性。建立了阿霉素血浆样品和组织样品中的含量分析方法。大鼠体内药动学实验结果表明,与阿霉素溶液组相比,静脉注射三种不同分子量的[D]NP后,消除半衰期(t1/2)、药-时曲线下面积(AUC)与体内平均滞留时间(MRT)均显著增加(P<0.05),同时表观分布容积(Vz)和血浆清除率均显著降低；且随着分子量增加,AUC(o-∞)显著增大(P<0.01),清除率(CL)显著降低(P<0.05)。表明[D]NP消除较阿霉素溶液显著减慢,可以显著延长阿霉素的血液循环时间,且CS分子量越大,长循环效果越好。与阿霉素溶液组相比,[D]NP组在荷肝癌H22实体瘤小鼠的心、肺和肾脏的分布显著降低,而在肝脏、脾、肿瘤和血液中的分布明显增加,三个靶向评价指标均表明[D]NP具有明显的肝、脾和肿瘤靶向性以及长循环特性,且随着分子量增加,上述靶向效果更明显。荷肝癌H22实体瘤小鼠体内药效学实验结果表明,不同分子量CS制备的载药纳米粒中[D]NP-600 kDa和[D]NP-300 kDa抑瘤作用较强,且抑瘤效果存在剂量依赖性。相同剂量下(5mg/kg), DOX溶液组与[D]NP-600 kDa组抑瘤效果无显著差异：提高[D]NP药物剂量至10 mg/kg时,[D]NP-600 kDa的抑制作用显著增强,且小鼠存活率更高。说明制备成纳米粒,在不降低疗效的同时,可显著降低阿霉素的毒副作用。