背景与目的腹股沟疝是普通外科最常见的疾病之一。但是,对腹股沟疝的确切病因,目前还不清楚。多年来,人们一直认为腹股沟疝的发生是由腹肌沟区的组织强度降低和腹内压增高引起的。近年来,有学者从生物化学角度提出了胶原代谢异常学说,认为腹肌沟疝患者机体结缔组织中Ⅰ型胶原蛋白减少、Ⅲ型胶原蛋白相对增多,Ⅰ：Ⅲ型胶原蛋白比例降低,导致腹股沟区腹横筋膜薄弱或缺损,抗张能力减低,引起疝的发生。该学说目前得到多数专家的认可。胶原蛋白是一种结构蛋白质,是细胞外基质中的主要成分。人类机体的细胞外基质中存在有20余种不同的胶原蛋白。在皮肤、腱膜及筋膜等结缔组织中,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白是其主要的胶原蛋白。其中,Ⅰ型胶原是成熟的胶原蛋白,较为粗大,具有较强的抗张能力,广泛存在于皮肤、筋膜、韧带及其它纤维组织中；而Ⅲ型胶原是不成熟的胶原蛋白,其弹性较高而抗张能力相对较低,在上述各组织中的含量相对较少,主要存在于正在愈合的伤口中，特别初期愈合的伤口。在临床工作中,我们将成人腹股沟疝分为直疝和斜疝两种类型。对于成人腹股沟疝发生发展原因与胶原蛋白代谢之间的关系,以及直疝和斜疝患者之间的胶原蛋白代谢是否存在差异,在目前国内国际报道甚少。本实验是采用免疫组织化学方法研究成人腹股沟直疝和斜疝患肯腹直肌前鞘中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达情况,并与无疝者进行对比,进一步探讨胶原蛋白代谢与腹股沟疝发生发展的关系,为腹股沟疝的病因研究及临床治疗提供理论依据。材料与方法1实验设计实验组：分为直疝组和斜疝组纰。直疝组：成人原发性腹股沟直疝患者20例,年龄在31-72岁之间,平均年龄56.05岁；斜疝组：成人原发性腹股沟斜疝患者20例,年龄在29-78岁之间,平均年龄55.50岁。对照组：无疝患者20例,年龄在33-74岁之间,平均年龄54.85岁。按照世界卫生组织WHO标准定义确定每天吸卷烟1支以上连续或累计6个月者为经常抽烟者。实验组和对照组中经常吸烟者共33人,其中直疝组13人,斜疝组11人,对照组9人；非经常吸烟者共27人标本均取材于2011年5月至2012年10月郑州大学第一附属医院收治的外科手术患者，均为男性。取材部位均为下腹壁腹直肌前鞘,面积约为10mm*5mm。取材后立即置于10%福尔马林溶液中固定。所有样本在取材前均已获得当地伦理委员会批准并取得患者本人及家属签字同意。排除标准：糖尿病患者、低蛋白血症患者、结缔组织疾病患者以及近期接受过甾体类激素或其他免疫抑制剂治疗的患者。2实验方法主要方法：本次实验采用免疫组化SP法测量腹直肌前鞘中Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白含量,以积分光密度值相对定量形式表示主要试剂：兔抗人Ⅰ型胶原多克隆抗体(美国SANTA CRUZ生物制剂公司),兔抗人Ⅲ型胶原多克隆抗体(美国SANTA CRUZ生物制剂公司),SP9000即用型免疫组化试剂盒(北京中杉生物工程公司)以及DAB显色试剂盒(北京中杉生物工程公司)3统计学处理所得结果以均数±标准差(x±s)表示。用SPSS17.0统计软件对实验数据进行分析。两组计量资料均数的比较采用t检验,两组以上计量资料间均数的比较采用单因素方差分析(ANVOA),以P<0.05为差异有统计学意义。结果1Ⅰ型胶原蛋白的表达(IOD值)对照组为166.93±7.25。直疝组为112.86±3.61,与对照组比较呈低表达,有显著性差异(P<0.05)。斜疝组为132.33±8.05,与对照组比较呈低表达,有显著性差异(P<0.05)。直疝组与斜疝组对比,直疝组较低,有显著性差异(P<0.05)。2Ⅲ型胶原蛋白的表达(IOD值)对照组为111.30±3.02。直疝组为172.35±12.07,与对照组比较呈高表达,有显著性差异(P<0.05)。斜疝组为129.72±7.28,与对照组比较呈高表达,有显著性差异(P<0.05)。直疝组与斜疝组对比,直疝组较高,有显著性差异(P<0.05)。3Ⅰ-Ⅲ型胶原蛋白比值对照组为1.50±0.03。直疝组为0.66±0.03,与对照组比较为降低,有显著性差异(P<0.05)。斜疝组为1.02±0.02,与对照组比较为降低,有显著性差异(P<0.05)。直疝组与斜疝组对比,直疝组较低,有显著性差异(P<0.05)。4经常吸烟组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达(IOD值)非经常吸烟组Ⅰ型胶原蛋白的表达为148.02±19.29。经常吸烟组为128.66±24.02,与非经常吸烟组比较呈低表达,有显著性差异(P<0.05)。非经常吸烟组Ⅲ型胶原蛋白的表达为126.83±23.05。经常吸烟组为146.76±27.07,与非经常吸烟组比较呈高表达,有显著性差异(P<0.05)。非经常吸烟组Ⅰ：Ⅲ型胶原蛋白的比值为1.34±0.05。经常吸烟组为0.97±0.08,与非经常吸烟组比较为降低,有显著性差异(P<0.05)。结论1.成人腹股沟疝患者腹直肌前鞘中Ⅰ型胶原蛋白减少,Ⅲ型胶原蛋白增多,Ⅰ：Ⅲ型胶原蛋白比例降低,导致腹股沟区腹横筋膜薄弱或缺损,可能是腹股沟疝发生发展的重要原因。2.成人腹股沟直疝与斜疝比较,直疝患者腹直肌前鞘中Ⅰ型胶原蛋白更少,Ⅲ型胶原蛋白更多,Ⅰ：Ⅲ型胶原蛋白比例降低更为明显,胶原代谢更加紊乱。表明胶原代谢在腹股沟直疝发生发展中的作用比斜疝更为重要。3.经常吸烟者腹直肌前鞘中Ⅰ型胶原蛋白减少,Ⅲ型胶原蛋白增多,Ⅰ：Ⅲ型胶原蛋白比例降低。表明吸烟是导致胶原代谢紊乱的重要原因,结果导致腹股沟疝的发生。