三种瑞香科植物醇提物对HIV-1潜伏感染再激活作用的研究

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尽管高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral therapy,HAART)能够有效抑制艾滋病毒的复制,将病毒载量降低至不可检测到的水平,但仍不能彻底清除病毒。人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)在体内的潜伏感染是无法治愈艾滋病的重要原因,“激活再杀伤”(shock and kill)治疗策略是艾滋病治疗的一个新方向。本课题采用HIV-1潜伏感染模型(J-Lat 11.1细胞),通过流式细胞技术检测GFP阳性细胞率来评价了哥王60%醇提物、芫花100%醇提物和黄芫花60%醇提物对HIV-1潜伏感染的再激活作用。结果表明了哥王60%醇提物的有效剂量范围约为0.33μg/mL-208.30μg/mL;芫花100%醇提物的有效剂量范围约为0.08μg/mL-52.63μg/m L;黄芫花60%醇提物的有效剂量范围约为0.05μg/mL-166.70μg/m L。三种瑞香科植物醇提物的再激活作用均是从加药后4 h开始发挥作用的。经PKC抑制剂(G?6983或G?6850)或NF-κB抑制剂(PDTC或BAY 11-7082)预处理后,植物醇提物对J-Lat 11.1细胞的再激活作用降低(p<0.05),而G?6976不影响其再激活作用(p>0.05),提示PKC(βⅡ,γ,δ或ζ亚型)通路及NF-κB通路可能参与醇提物的再激活作用。采用活细胞成像技术建立了EGFP-PKC/NF-κB核易位的实时定量检测方法,并探讨了醇提物对EGFP-PKC/NF-κB核易位的影响。结果显示了哥王60%醇提物和黄芫花60%醇提物能够促进EGFP-PKC-α核易位;了哥王60%醇提物、芫花100%醇提物和黄芫花60%醇提物均能促进EGFP-PKC-δ和EGFP-p65的核易位。PKC抑制剂G?6983能够阻断了哥王60%醇提物和芫花100%醇提物对EGFP-p65的核易位作用,不能抑制黄芫花60%醇提物对EGFP-p65的核易位作用;G?6850和G?6976不影响了哥王60%醇提物、芫花100%醇提物和黄芫花60%醇提物对EGFP-p65的核易位作用。提示了哥王60%醇提物和芫花100%醇提物可能通过PKC-δ/ζ亚型使NF-κB p65发生核易位,黄芫花60%醇提物可能不是通过PKC促使NF-κB p65发生核易位的。
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