【摘 要】
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创伤后应激障碍(post traumatic stress disorder,PTSD)是指个体遭遇严重威胁、创伤、恐惧事件后,导致个体延迟出现和长期持续存在的精神障碍。PTSD患者常伴有焦虑、抑郁等中枢神经系统共性疾病,其发病机制至今仍不清楚,目前主要治疗方式为药物治疗和心理治疗。临床上药物治疗主要为西药,疗效不佳且副作用大,而心理治疗存在疗程较长且个体差异大。PTSD是一种发病机制复杂、多因素
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创伤后应激障碍(post traumatic stress disorder,PTSD)是指个体遭遇严重威胁、创伤、恐惧事件后,导致个体延迟出现和长期持续存在的精神障碍。PTSD患者常伴有焦虑、抑郁等中枢神经系统共性疾病,其发病机制至今仍不清楚,目前主要治疗方式为药物治疗和心理治疗。临床上药物治疗主要为西药,疗效不佳且副作用大,而心理治疗存在疗程较长且个体差异大。PTSD是一种发病机制复杂、多因素、临床症状多的综合征。中药因其安全性高、副作用低、作用靶点多等特点,可能会为PTSD的治疗提供更优的治疗策略。目前有研究表明,部分中药治疗PTSD能明显改善患者症状,尽管相关的研究机制不明确,但为其后续研究指明了方向并提供了理论依据。牛蒡子苷元(Arctigenin,ARC)是中药牛蒡中的主要活性成分,其生物学功能多样。研究表明,ARC可通过调节抑制核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路和缓解内质网应激等作用来抑制神经炎症、氧化应激,减少神经元凋亡。在阿尔兹海默症、抑郁症等中枢神经系统疾病中有较好的治疗效果。既往研究也表明ARC可调控学习记忆及认知能力,改善焦虑、抑郁等PTSD样症状,从而为ARC对PTSD的治疗提供了理论依据。为探讨ARC对PTSD大鼠行为学的影响及相关作用机制,本研究采用单一连续刺激(single-prolonged stress,SPS)法制备PTSD大鼠实验动物模型,通过腹腔注射ARC给药干预,采用行为学检测评价ARC对PTSD大鼠的治疗效果,并进一步从组织病理学及分子水平观察ARC对PTSD大鼠海马神经元炎症水平、神经元凋亡及抗氧化效果等的影响,深入探讨相关的作用机制,为ARC作为治疗PTSD的相关研究及药物开发提供理论基础。主要研究内容:1.制备PTSD实验动物模型及药物干预采用SPS法制备PTSD大鼠实验动物模型,按随机分配原则分为正常对照(Control)组、PTSD牛蒡子苷元低剂量组[PTSD+ARC(5 mg/kg)]、PTSD牛蒡子苷元中剂量组[PTSD+ARC(15 mg/kg)]和PTSD牛蒡子苷元高剂量组[PTSD+ARC(45 mg/kg)]、PTSD组,每组12只,通过观察动物的生命体征初步评价给药效果。2.牛蒡子苷元对PTSD大鼠行为学的影响在给药结束后,通过行为学方法检测实验动物的行为学差异,根据行为学数据分析,进一步探讨ARC对PTSD大鼠的行为学改善作用。3.牛蒡子苷元对PTSD大鼠行为学改善的作用机制采用组织病理学染色检测实验动物海马区神经元的数量、形态、轴突的长度、分布情况,观察ARC对PTSD大鼠海马神经元保护作用。通过免疫荧光染色、Western blot技术分析实验动物海马组织中的炎症因子(NF-κB p65、IκBα、COX-2、i NOS)和凋亡蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)的表达量,采用ELISA实验测定实验动物血清中的炎症因子TNF-α和IL-1β的表达水平,抗氧化性检测测定血清中氧化应激分子丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的含量,从分子水平探讨牛蒡子苷元对PTSD行为学改善的作用机制。主要结果及结论:1.成功制备了PTSD大鼠模型,根据行为学检测表明ARC可以增强PTSD大鼠在旷场中的探索行为、改善其焦虑状况以及提高学习记忆能力。2.组织病理染色结果表明ARC对PTSD大鼠行为学改善的组织病理学机制可能是通过抑制海马神经元凋亡及维护轴突形态和数量来实现的。3.分子检测结果表明ARC对PTSD大鼠行为学改善的分子机制可能是通过减轻实验动物海马神经元的炎症水平及通过抗氧化活性共同作用抑制海马神经元凋亡来实现的。
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