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黄曲条跳甲是十字花科蔬菜的主要害虫之一,其抗药性问题日益严重。本论文对黄曲条跳甲不同种群对毒死蜱的敏感性及酶活性进行测定,并克隆了酯酶基因和乙酰胆碱酯酶基因,有助于抗性酶性质的深入研究、杀虫剂合理设计,为黄曲条跳甲的抗性治理提供必要的科学依据。采用生物测定方法测定黄曲条跳甲2个室内实验种群(蔊菜实验种群、上海青实验种群)和1个田间自然种群对毒死蜱的LC50值,结果表明,焯菜实验种群对毒死蜱的LC50值最低,为30.3459 mg/L;田间自然种群对毒死蜱的LC50值最高,为77.8448 mg/L,敏感性指数为0.39。对不同种群黄曲条跳甲乙酰胆碱酯酶(AChE)、羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的活性测定结果表明,黄曲条跳甲田间自然种群AChE活性最低,与蔊菜实验种群、上海青实验种群相比,差异极显著(P<0.01);田间自然种群GSTs活性最高,与蔊菜实验种群、上海青实验种群相比,差异极显著(P<0.01);黄曲条跳甲田间自然种群CarE活性最高,蔊菜实验种群CarE活性最低,二者差异极显著(P<0.01);说明毒死蜱对乙酰胆碱酯酶的活性有抑制作用,CarE、GST活性的提高可能促进黄曲条跳甲对毒死蜱产生抗药性。根据已发表的酯酶基因和乙酰胆碱酯酶基因核苷酸序列及氨基酸序列的保守区域,分别设计上游引物和下游引物,利用反转录—多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法对黄曲条跳甲酯酶基因和乙酰胆碱酯酶基因的保守序列片段进行克隆和序列分析,结果得到酯酶基因281 bp的目的片段和乙酰胆碱酯酶基因406 bp的目的片段。利用3′-RACE技术获得酯酶基因的3′端(1468 bp),编码442个氨基酸,核苷酸序列同源性分析表明,与赤拟谷盗Tribolium castaneum est1基因和杂拟谷盗Triboliumconfusum est1基因的同源性最高,为71%(211/297),与果蝇Drosophila melanoqasteralpha-esterase5的同源性为70%(156/222),氨基酸序列与杂拟谷盗、赤拟谷盗、果蝇的酯酶基因的同源性分别为43%(188/434)、43%(188/434)、33%(144/432)。从BLAST结果可初步推测该片段应为编码黄曲条跳甲酯酶基因的部分核苷酸序列,该序列在GenBank中的登录号为EU166919。乙酰胆碱酯酶基因目的片段的核苷酸序列同源性分析表明,与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata AChE的同源性最高,为75%(303/402);与褐飞虱Nilaparvatalugens ACHE2同源性为73%(300/407);与其它20种昆虫的AChE基因同源性均为68%以上,氨基酸序列与马铃薯甲虫,棉铃虫,桑蚕的AChE基因的同源性分别为87%(119/136),83%(114/136),83%(114/136)。从BLAST结果可初步推测试验所获得的406bp片段应为编码黄曲条跳甲AChE基因的部分核苷酸序列,该序列在GenBank中的登录号为EU169456。