疝补片对雄性成年大鼠生殖功能的影响

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背景腹股沟疝是指发生在腹股沟区域的腹外疝。是普通外科临床上常见的疾病之一,其发病率高于目前任何一种恶性肿瘤。每年全世界腹股沟疝手术量超过2000万例,中国每年约有300万新发的腹股沟疝患者,尤以老年男性为甚,据统计发病率可高达11.6‰。手术是目前唯一的治愈方法,技术上也已趋于成熟,腹股沟疝的发病率具有很大的性别差异,男性患者占绝大多数,男女比例达15:1。男性腹股沟区有精索通过,因此疝修补术对男性生殖功能的影响可能较大,但是目前关于腹股沟疝无张力修补术对于男性生殖功能的影响仍无统一定论。目的通过建立成年雄性S-D大鼠腹股沟疝无张力修补的实验动物模型,比较疝补片对睾丸、精索等结构的影响,探讨开放性无张力腹股沟疝修补术对大鼠生殖功能的影响,进而为腹股沟疝的临床治疗抉择提供理论依据。方法选取SPF级S-D(Sprague-Dawley)雄性大鼠,按完全随机设计分组并称重,分别为对照组(NC组)、假手术组(FO组)和手术组(OP组),取左侧腹股沟区,其中对照组仅常规备皮、消毒;假手术组和手术组在常规备皮、消毒后,水合氯醛溶液腹腔注射麻醉,取左侧腹股沟区距离阴茎旁大约0.5cm处长约1cm的纵行手术切口,逐层解剖游离出精索及其血管后,假手术组间断缝合切口,而手术组则用大小约2.0cm×1.0cm的疝补片分别包绕该侧的输精管和精索血管并固定后逐层单纯间断缝合切口。术后观察大鼠的生命体征、活动度以及进食情况,观察有无感染切口,有无皮下血肿积液等一般情况,必要时给予适当的对症治疗。术后90天,处死大鼠,观察腹股沟区疝补片与精索的粘连程度;完整分离双侧睾丸,使用天平称读各个大鼠双侧睾丸重量,排水法测量每个睾丸的体积;从附睾中取出精液来检测精子活力;取补片处精索行HE染色观察输精管的变化;取术侧睾丸行HE染色观察睾丸组织病理改变及生精细胞分级,同时行免疫组化来比较各组实验动物中HIF-1a的表达差异;从右心室取大鼠静脉血,通过ELISA检测法比较各组中抗精子抗体的浓度。结果术后对照组大鼠腹股沟区无粘连,假手术组腹股沟区精索周围轻微粘连,而手术组,疝补片与精索间的粘连较严重,需要锐性分离才可以分开。疝补片作为外来异物,可引起更严重的异物炎症反应,导致手术区周围组织粘连。处死动物后,称取双侧睾丸重量及体积,结果显示:对照组和假手术组左右两侧睾丸重量及体积无明显差异,手术组实验侧的睾丸重量及体积有所减小,与对侧相比虽无统计学差异,但显著小于同侧的其他两组睾丸体积(P<0.05)。术后对照组大鼠生精功能正常,可见各级生精细胞代谢旺盛。假手术组生精现象基本上是处于正常状态的,小部分的曲细精管管腔处于栓塞状态。手术组大鼠精子发生过程存在显著异常,各级生精细胞层数明显减少,生发上皮杂乱无序,曲细精管内可见较多精子细胞,精子较少见,并且管腔被部分阻塞。此外,对HIF-1a进行测定,结果显示:对照组和假手术组表达无统计学差异(P>0.05),而在手术组中表达显著升高(P<0.05)。此外,观察精索病理改变,对照组输精管管腔通畅无梗阻,其内可见精子,管径正常,内膜光滑、完整,粘膜皱襞致密;假手术组大鼠输精管管腔通畅,其内可见精子,管径正常,内膜光滑、完整,粘膜皱襞致密,与对照组相比变化不明显;手术组大鼠较对照组动物,输精管横截面积明显有缩小,内膜明显萎缩,粘膜皱襞紊乱。对精子活力进行测定,各组大鼠精液中a+b级精子百分比统计结果显示:对照组与假手术组动物,在a+b级精子所占的百分比无明显统计学差异(P=0.153),而手术组动较前两组动物,具有统计学差异(P<0.05)。对血清抗精子抗体含量进行测定,抗精子抗体在对照组及假手术组中含量均较低,无统计学差异(P=0.056)。手术组中抗精子抗体的表达显著高于前两组(P<0.05)。结论1、无张力疝修补术后疝补片对雄性成年大鼠生殖功能有不良影响;2、腹股沟疝治疗应采用个体化方案,减小对术后患者生殖功能的影响。
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