龈沟液Ⅰ型胶原氨基末端肽水平与牙周病变关系的研究

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目的:Ⅰ型胶原在牙周组织中广泛分布,约占牙槽骨有机成分的80%-90%,占牙周韧带胶原含量的80%,牙龈结缔组织中也含有大量的Ⅰ型胶原。Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(N-terminal type I collagen telopeptide, NTX-I)是Ⅰ型胶原降解时产生的交联物的一部分,Ⅰ型胶原纤维的氨基端通过吡啶啉或脱氧吡啶啉与另一胶原分子和930位氨基酸形成NTX,由破骨细胞活性增加、骨胶原降解产生,在骨吸收过程中,这些片段被释放出来,被认为是骨吸收的特异性标志物。牙周炎是以牙周组织破坏为特征的疾病,牙周病时出现牙龈胶原纤维束、牙槽骨结构的破坏和附着丧失,Ⅰ型胶原的降解产物——NTX有可能被释放到龈沟液中,与牙周病的病变程度、牙周支持组织的完整性密切相关,但目前尚未见到相关研究报告。本研究采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测健康牙周和牙周病变位点龈沟液中NTX含量的水平,分析NTX在牙周病病变过程中的变化趋势及其与主要临床指标之间的关系,探讨NTX在对牙周炎辅助诊断中的价值。方法:1临床资料:本实验选取于白求恩国际和平医院门诊就诊的牙周健康及牙周病患者共41例,均接受系统牙周检查以及拍摄全口曲面断层片,按照《牙周病学》的诊断标准以及文献中记载的慢性牙周炎活动期诊断标准分为牙周健康组、慢性龈缘炎组、慢性牙周炎静止期组及慢性牙周炎活动期组,牙周健康组选取右上第一磨牙为受试牙,慢性龈缘炎组、慢性牙周炎组选取临床症状最明显的牙为观测牙,每人采集近颊、远舌两个位点的龈沟液标本合为一份,共41份。2龈沟液取样方法:应用滤纸条称重法收集龈沟液样本,采用Lamster描述的方法,用已称重好的2 mm×10 mm Whatman 3号滤纸条插入取样牙的近颊、远舌2个位点的龈沟内,30 s取出滤纸条后放入Eppendorf管再次称重,放入-20℃保存,待测。3牙周检查记录数据:牙龈指数(gingival index, GI),牙周袋最大探诊深度(probing depth, PD),附着丧失(attachment loss, AL)。4使用成品NTX试剂盒ELISA法测定龈沟液中NTX的浓度。结果:1牙周健康组、慢性龈缘炎组、慢性牙周炎静止期组、慢性牙周炎活动期龈沟液体积实验结果的比较: 1.1牙周健康组龈沟液体积为1.04±0.375μl 1.2慢性龈缘炎组龈沟液体积为1.06±0.390μl 1.3慢性牙周炎静止期组龈沟液体积为1.32±0.432μl 1.4慢性牙周炎活动期组龈沟液体积为1.80±0.268μl 1.5四组龈沟液体积的测定值经单因素方差分析P=0.046,P<0.05,四组龈沟液体积的测定值总体不相等,提示四组龈沟液体积不同,随采集位点中牙周病变程度的加重可采龈沟液体积增加。使用LSD-t检验法进行组间两两比较,牙周健康组、慢性龈缘炎组、慢性牙周炎静止期组与慢性牙周炎活动期组间P<0.05,差异有统计学意义,提示慢性牙周炎活动期组与其它三个组龈沟液体积总体不相同,即牙周炎的活动性病变中可采集龈沟液体积明显高于慢性牙周炎静止期、慢性龈缘炎。牙周健康组与慢性龈缘炎组、牙周健康组与慢性牙周炎静止期组、慢性龈缘炎组与慢性牙周炎静止期组组间比较P>0.05,提示牙周健康组,慢性龈缘炎组,慢性牙周炎静止期,三组间龈沟液体积无差别。2牙周健康组、慢性龈缘炎组、慢性牙周炎静止期组、慢性牙周炎活动期龈沟液中NTX含量实验结果的比较: 2.1牙周健康组龈沟液中NTX含量为2.27±0.373nmol/L。2.2慢性龈缘炎组龈沟液中NTX含量为2.50±0.398nmol/L。2.3慢性牙周炎静止期组龈沟液中NTX含量为2.73±0.582nmol/L。2.4慢性牙周炎活动期组龈沟液中NTX含量为3.30±0.895nmol/L。2.5四组龈沟液NTX含量的测定值经单因素方差分析P=0.017,P<0.05,四组龈沟液NTX含量总体不相等,提示四组龈沟液NTX含量不同,随采集位点中牙周病变程度的加重龈沟液NTX含量增加。使用LSD-t检验法进行组间两两比较,牙周健康组、慢性龈缘炎组、慢性牙周炎静止期组与慢性牙周炎活动期组间P<0.05,差异有统计学意义,提示慢性牙周炎活动期组与其他三个组龈沟液NTX含量总体不相等,即活动期牙周病变龈沟液NTX水平明显高于慢性牙周炎静止期、慢性龈缘炎。慢性牙周炎活动期组龈沟液中NTX含量测定值的95%可信区间为(2.608, 3.983)nmol/L。牙周健康组与慢性牙龈炎组、牙周健康组与慢性牙周炎静止期组、慢性牙龈炎组与慢性牙周炎静止期组组间比较P>0.05,提示牙牙周健康组,慢性龈缘炎组,慢性牙周炎静止期,三组间NTX含量无差异。3龈沟液中NTX含量的测定值与牙龈指数、牙周探诊深度、附着丧失的相关系数r分别为:0.420、0.519、0.421(P<0.05),在统计学上存在正相关关系。结论:1本实验结果显示随采集位点牙周病变程度的加重,可采龈沟液体积增加,并且慢性牙周炎活动期组龈沟液体积高于慢性牙周炎静止期、慢性龈缘炎组、牙周健康组三个组,提示龈沟液体积变化反映了牙周病变的程度变化。2本实验结果还显示出随采集位点中牙周病变程度的加重龈沟液NTX含量增加,提示龈沟液中NTX水平的变化与牙周病变发展密切相关;并且活动期牙周病变龈沟液NTX水平明显高于慢性牙周炎静止期、慢性龈缘炎组、牙周健康组,故龈沟液中NTX的水平有可能成为评价牙周病牙周组织炎症与破坏程度的重要参考指标。3龈沟液中NTX含量的测定值与牙龈指数、牙周探诊深度、附着丧失在统计学上存在正相关关系,但是根据统计学原理表示相关密切程度的决定系数都不大,需要进一步研究。4龈沟液中NTX含量的水平测定方法简便易行,可以比牙周临床指数更准确地反映牙周病病变的变化,为牙周病诊断提供了新的参考指标。
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