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目的： 1.检测miR-194在不同衰老细胞模型中的表达水平。 2.研究miR-194对细胞衰老、增殖等表型的影响。 3.探讨miR-194调节细胞衰老进程的潜在分子机制。 方法： 1.建立体内、体外多种衰老模型，利用荧光定量 PCR检测miR-194在不同衰老模型中的表达情况。 2.在MEF细胞或NIH/3T3细胞中过表达或沉默miR-194，利用衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色、western blot实验检测细胞衰老标记分子p16的表达水平变化，观察 miR-194对细胞衰老进程的影响；利用 BrdU实验检测miR-194对MEFs细胞增殖能力的影响。 3.利用荧光定量 PCR、 Western Blot、双荧光素酶报告系统等实验鉴定miR-194下游功能性靶基因，探讨miR-194影响细胞衰老的分子机制。 结果： 1. miR-194在多种衰老模型中表达水平明显上调 利用连续传代建立MEFs和HUVECs细胞的复制性衰老模型，过氧化氢刺激诱导NIH/3T3细胞衰老，以及生理性衰老小鼠组织中，利用qPCR结果显示， miR-194在衰老细胞及衰老小鼠肾脏和肝脏组织中表达水平显著上调。 2. miR-194促进MEFs细胞复制性衰老 在MEFs细胞中转染Agomir194或Agomir NC（对照）以及Antagomir194或Antagomir NC（对照）。过表达效率达到上百倍，抑制效率60%左右。随后利用SA-β-gal染色实验，Western blot，以及BrdU实验检测miR-194对细胞衰老、增殖的影响。实验结果显示：在MEFs细胞中过表达miR-194可以显著促进细胞的衰老以及抑制细胞的增殖。反之，抑制miR-194则显著延缓MEFs细胞衰老，同时促进细胞的增殖。 3. miR-194促进过氧化氢诱导的NIH/3T3细胞衰老 在NIH/3T3细胞中转染Agomir194或Agomir NC（对照）以及Antagomir194或Antagomir NC（对照）。过表达效率上百倍，抑制效率60%左右。随后利用相同的实验检测miR-194对细胞衰老及增殖的影响。结果显示：过表达miR-194可以显著促进细胞衰老以及抑制细胞的增殖；反之，抑制miR-194则显著延缓NIH/3T3细胞衰老，同时促进细胞的增殖。 4. DNMT3A是miR-194下游靶基因 通过 microRNAs靶基因预测软件，以及双荧光素酶报告统鉴定 DNMT3A是miR-194的靶基因，miR-194有可能通过负调控DNMT3A影响细胞衰老进程。 结论： 1. miR-194在不同的细胞衰老模型以及衰老小鼠组织中表达明显上调。 2.miR-194可显著促进MEF细胞复制性衰老进程，并抑制细胞增殖。 3.miR-194可加速过氧化氢诱导的NIH/3T3细胞衰老进程。 4. DNMT3A是miR-194的靶基因。