蛋品胆固醇脱除技术及胆固醇-β-环糊精包合物中胆固醇提取、纯化的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chunya88
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究动物性食品中胆固醇的脱除,寻找有效降低食品中胆固醇含量的方法,对于降低因摄入高胆固醇食品而对人体造成的危害具有重要意义。利用具有降胆固醇活性的微生物、酶或其他物理化学方法以降低动物性食品中的胆固醇是开发低胆固醇食品的研究热点和难点。本论文研究了蛋品胆固醇的脱除技术,以及胆固醇-β-环糊精包合物中胆固醇的提取、纯化的方法。  论文用胆固醇氧化酶指示平板和测定胆固醇氧化酶活力的方法对干酪乳杆菌21008是否具有产生胆固醇氧化酶的能力进行了研究;同时以添加胆固醇的MRS培养基对其进行培养,研究体外降胆固醇机理。然后用蛋黄对菌株降胆固醇能力进行了评价。结果发现,干酪乳杆菌能产生胆固醇氧化酶类似物,并且测得胞内酶活为302.7 U/L,但没有胞外酶。菌株使MRS-CHO培养基中降胆固醇作用主要是通过菌体细胞吸收,胆固醇氧化酶等酶类转化和微弱的沉淀作用。在蛋黄中发酵,优化条件下:V蛋黄∶V水=2∶1,接种量8%,发酵30h,胆固醇含量由7.24 mg/g降到6.02 mg/g,降低16.82%; pH由6.32降为5.57。  优化了灰色链霉菌产胆固醇氧化酶条件,评价了胆固醇氧化酶在蛋黄中的降胆固醇效果。通过筛选培养基得到GMP培养基效果较好;再以此为发酵培养基对碳源、氮源优化。在确认优化后的培养基基础上,用正交试验,得到灰色链霉菌产胆固醇氧化酶的发酵条件:接种8%,30℃,180 r/min培养3d,产酶可达936.9 U/L。将提取的胆固醇氧化酶粗酶液应用于蛋黄胆固醇的脱除,蛋黄与蒸馏水按1∶2(v/v)稀释后,接种粗酶液3 U/mL、37℃,200 r/min下处理时间16h,胆固醇脱除率达46.2%。  以β-环糊精为媒介对蛋黄油脂胆固醇的脱除进行了研究,选用5因素5水平的中心组合设计,以水油比(W∶O)、β-环糊精与油之比(β-CD∶O)、时间、温度、搅拌速度为影响因素,以胆固醇脱除率、蛋黄油脂回收率为响应值,建立了回归模型。结果表明,温度,W∶O与时间、时间与搅拌速度的交互效应对两响应值都有显著影响(P<0.01);W∶O与β-CD∶O、W∶O与温度、时间与温度的交互效应虽对胆固醇脱除率影响不显著(P>0.05),但对油脂回收率有显著影响(P<0.01)。利用渴求函数的响应曲面图、等高线图优化两响应,确定了最佳工艺条件:W∶O=1.45(V/m),β-CD∶O=0.30(m/m),时间21.83 min,温度10.00℃,搅拌速度975.83 r/min。在此条件下,预测渴求值为0.752,胆固醇脱除率为72.48%,油脂回收率为68.05%。  对胆固醇-β-环糊精包合物中胆固醇的提取、纯化方法进行研究。利用超声辅助乙醇提取包合物中胆固醇,以响应面分析(RSM)为试验设计方法,系统研究了乙醇/包合物比(mL/g),超声功率(W),提取温度(℃)和提取时间(min)对胆固醇提取率的影响;同时与索氏提取、摇瓶提取和逆流提取进行了对比。结果发现,在最优条件液固比10 mL/g,超声功率251 W,提取温度56℃和提取时间36 min下胆固醇提取率为98.12%,胆固醇湿重含量为43.38 mg/g。四个因素对胆固醇提取率表现为正效应且影响显著(P<0.05)。料液比与超声功率,超声功率与提取温度间的交互作用对胆固醇提取率有显著影响(P<0.05)并表现为负效应。超声辅助提取相比传统提取方法获得较高的提取率的同时能够降低提取温度、节省提取时间和溶剂消耗。硅胶柱层析和结晶纯化胆固醇后HPLC分析发现,以正己烷∶异丙醇(98∶2,V/V)为洗脱液,200~300目硅胶为固定相,上载量2.5%,以1 mL/min的流速洗脱对胆固醇有较好的分离效果;合并富含胆固醇的馏分并结晶,得到HPLC纯度为95.03%的胆固醇,回收率为70.2%,产率22%。
其他文献
在9700万河南人印象里,去年12月12日上任的省委书记徐光春,很少有时间呆在办公室里.短短几个月,他马不停蹄,几乎走遍中原的山山水水.人们时常看见他活跃在田间、车间的身影,
随着全控型电力电子器件的发展和新能源并网需求的增加,基于电压源型换流器的多端直流输电(VSC-MTDC)技术受到越来越多的关注。对于含VSC-MTDC的交直流系统,潮流计算是研究系统稳态及暂态运行特性的重要基础;而控制直流系统电压稳定是维持整个系统稳定运行的重要前提。本文研究含VSC-MTDC的交直流系统潮流控制算法及直流电压控制,所做工作主要如下:首先,本文结合换流站稳态模型及控制方式,确立了V
学位
一直以来,作文教学在小学语文教学中非常重要,不仅对学生正确人生观和价值观的树立有着重要帮助,还可以有效锻炼学生的整体思维能力.在这样的情况下,教师应创新教学模式,以此
期刊
该文对同步整流器的基本原理及优点进行了分析,并对各种驱动方式进行了详细的比较和分析.由分析知,电压驱动结构简单,但是应用范围受到一定限制,且存在一些自身不能克服的缺
This paper deals with the AC -drive locomotive converter tests based on Pulse -Width Modulation (PWM) controls. Compared with limit of some current test systems
在小学语文作文中,想象作文能够激发学生的写作兴趣,同时培养学生的写作能力,一般而言,会让学生喜欢上写作.作文中加入想象的成分,要求写作的人大胆想象,对于指导教师而言,似
期刊
本文对基于WEB数据库的供水远程监控系统的设计进行了研究。文章围绕基于WEB数据库技术的远程监控系统的方案设计及实现中的关键技术进行论述的。设计了监控中心的WEB数据库,
本文通过对荣华二采区10
期刊
所谓作文先导式教学模式,是指将作文教学内容作为教学活动的先导操作形式,为师生构建作文沟通的平台,整合学生作文审美价值倾向,构筑全新作文教学新框架.“作文先导式”教学
期刊
该文结合"河南省网利用EMS在线实时信息进行稳定预决策并利用就地量实时控制的稳定控制系统"和"华中电网利用EMS实时信息进行自动计算智能决策并实现控制的新型稳定控制系统