针刺俞募穴对功能性便秘小鼠胃肠传输功能及ICC、SMC影响的研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:lovegyyf
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目的:  本研究探讨针刺俞募穴治疗功能性便秘小鼠,对其胃肠传输功能、结肠组织形态学及结肠ICC、SMC的影响,旨在探索针刺大肠俞募穴治疗该病的效应机制,为针刺治疗本病的临床选穴及应用提供科学依据。  方法:  1、实验一:选用昆明小鼠80只,随机分为5组:空白对照组、模型组、空白针刺组、针刺组、药物组,每组各16只。采用复方地芬诺酯灌胃法复制功能性便秘模型,选取双侧天枢、大肠俞交替针刺,每次电针30min,每天1次,5次为一个疗程,疗程之间休息2天,共治疗2个疗程。分别于第1、2疗程结束后,禁食不禁水12h,活性炭以0.1ml/10g的剂量进行灌胃,30min后处死小鼠,剪取肠管,测小肠推进率,同时取小鼠远端结肠,检测结肠平滑肌张力变化幅度。  2、实验二:选用昆明小鼠80只,随机分为5组:空白对照组、模型组、空白针刺组、针刺组、药物组,每组各16只。模型制作及电针操作均同实验一。各组分别于实验结束后取远端结肠,一部分用于MOTIC BA600Mot全自动数字高倍扫描显微镜观察结肠组织形态,另一部分用c-kit、α-SMA对ICC、SMC细胞进行免疫荧光双重标记,TCS-SP2激光共聚焦显微镜观测结果并采集图像,用Image-ProPlus6.0图像分析软件进行图像三维重建和荧光值定量分析,计算细胞荧光值。  结果:  1、胃肠传输功能检测  (1)小肠推进率  与空白对照组比较,模型组小鼠小肠推进率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),提示功能性便秘小鼠小肠推进速度减慢。与模型组比较,针刺组和药物组小肠推进率显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),提示针刺和药物可以明显加快功能性便秘小鼠的小肠推进速度。空白对照组与空白针刺组的小鼠小肠推进率进行比较,两者差异不明显(P>0.05),提示针刺对健康小鼠小肠推进率的改善作用不明显。第1、2疗程间比较,各组内小肠推进率变化不明显(P>0.05)。  (2)结肠平滑肌平均张力变化百分数  与空白对照组比较,模型组小鼠结肠平滑肌张力变化幅度呈降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,针刺可增强便秘小鼠的结肠平滑肌张力变化幅度(P<0.05);空白对照组与空白针刺组比较,两者结肠平滑肌张力变化幅度百分数的差异无统计学意义(P>0.05)。第1、2疗程间比较,各组内结肠平滑肌张力变化不明显(P>0.05)。  2、结肠组织形态学及ICC、SMC细胞激光共聚焦观察  (1)组结肠组织形态学观察  空白对照组:结肠平滑肌层厚度正常,平滑肌细胞排列整齐,形态正常,结肠黏膜完整,黏膜腺体丰富且排列整齐,无水肿及充血,肌层内肌间神经丛数量较多,神经细胞排列整齐;模型组:结肠平滑肌层厚度变薄,平滑肌细胞排列紊乱,细胞有空泡样变性,结肠黏膜完整性稍差,腺体萎缩,腺泡减少,分布稀疏,排列不规则,无水肿及充血,肌间神经丛数量减少,神经细胞排列紊乱,内见空泡样改变;空白针刺组、针刺组及药物组结肠形态学与空白对照组比较无显著差异。第1、2疗程间比较,各组内结肠组织形态学变化不明显。  (2)ICC及SMC细胞激光共聚焦观察  与空白对照组相比,模型组c-kit、α-SMA表达荧光强度明显减弱(P<0.01, P<0.01),空白针刺组c-kit表达荧光强度明显减弱(P<0.01),空白针刺组α-SMA表达荧光强度减弱(P<0.05);与模型组相比,针刺组及药物组c-kit表达荧光强度增强(P<0.05,P<0.05),针刺组α-SMA表达荧光强度增强(P<0.05),药物组α-SMA表达荧光强度呈上升趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。第1、2疗程间比较,各组内结肠c-kit、α-SMA表达荧光强度变化不明显(P>0.05,P>0.05)。  结论:  1.针刺大肠俞募穴对健康小鼠胃肠传输功能、结肠组织形态学及结肠ICC、SMC细胞的改善作用不明显。  2.针刺大肠俞募穴可以改善功能性便秘小鼠胃肠传输功能、结肠组织形态、增加小鼠结肠ICC和SMC的免疫荧光值,促进ICC和SMC的恢复,进而改善胃肠动力,治疗功能性便秘。  3.针刺大肠俞募穴治疗功能性便秘的疗效与针刺疗程不一定成正比,针刺治疗只需达到有效的刺激量即可。
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