【摘 要】
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冷胁迫是植物生长环境中的主要非生物胁迫之一,严重影响植物的生长发育以及农作物的产量。在植物对抗冷胁迫的过程中,蛋白质的磷酸化修饰起到了非常重要的调控作用。同时冷胁迫
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冷胁迫是植物生长环境中的主要非生物胁迫之一,严重影响植物的生长发育以及农作物的产量。在植物对抗冷胁迫的过程中,蛋白质的磷酸化修饰起到了非常重要的调控作用。同时冷胁迫还会引起ABA、生长素等各种生物激素相关蛋白质的变化。这些信号通路中的磷酸化动态变化使得整个植物体可以协同调控从而适应冷胁迫。为了更好地理解植物对冷胁迫的信号响应,我们系统地进行了拟南芥幼苗在冷胁迫下的动态磷酸化组学的定性和定量研究。拟南芥幼苗在4。C条件下分别处理0分钟、30分钟和24小时,之后用4%的SDS裂解缓冲液提取植物组全蛋白质。蛋白质被胰酶酶解成肽段之后,磷酸化肽段被二氧化钛亲和材料选择性富集并利用高分辨率轨道阱质谱仪进行鉴定。MaxQuant软件用来分析非标定量的磷酸化蛋白质组学数据。超高效液相色谱-质谱分析共鉴定了4631个蛋白质磷酸化位点。其中在冷处理的早期(30分钟)发现97个蛋白质表达水平上调和474个蛋白质表达水平下调,而在冷处理后期(24小时),发现227个蛋白质表达水平上调和549个蛋白质表达水平下调。冷处理显著地影响了蛋白激酶和蛋白磷酸化酶的生物学活性以及参与胁迫响应信号通路的磷酸化蛋白质底物。在冷处理过程中,一些低温敏感蛋白的磷酸化位点发生了显著的变化,比如钙离子平衡调节蛋白、激素转运蛋白、水通道蛋白以及液泡单糖转运蛋白。植物冷处理中磷酸化组学研究有助于深入理解植物抗冷调控机制并进一步改善植物的抗冷性能。
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