食管癌前病变诊断方法的探索性研究

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目的:长期以来,食管癌的早期发现、早期诊断、早期治疗(三早)是预防食管癌、提高食管癌患者生存率的有效方法。随着对食管癌发生机理研究的深入,许多学者意识到食管癌的癌前发现、癌前诊断、癌前治疗(三前)具有更重要的意义,所以,近年来癌前病变的诊断研究受到关注,但尚未见到切实可行的癌前病变的诊断方法。本研究在胃镜下结合碘染色技术和病理检查,进行电镜、流式细胞学检查以及糖原定量分析,探讨食管癌前病变的早期诊断方法。 方法:1胃镜下用生理盐水洗净粘膜表面附着的粘液后,用1.5%的碘液通过胃镜钳置放喷雾导管喷染食管,观察食管的病变部位与正常食管部位的区别,分别咬取标本送病理检查证实诊断。2胃镜下先用生理盐水冲洗食管,再用0.2%α-糜蛋白酶溶液彻底洗脱粘液,行碘染色后,根据食管粘膜着色情况分别咬取正常食管上皮组织、和着色不良区(病变区)组织,分别做扫描电镜和透射电镜观察;用流式细胞仪测定组织细胞的DNA含量、细胞增殖指数以及端粒酶的表达水平,同时做病理检查证实。3取食管癌术后大体标本,分别剪取正常食管上皮组织和癌组织(经病理证实),提取组织内糖原和蛋白进行定量分析。 结果:1胃镜显示:经碘染色后,正常食管上皮组织显示深褐色,不典型增生灶呈淡染或不着色,癌组织灶呈中文摘要边界清楚的不着色区。 2病理检查显示:光镜下不典型增生组织的_l:皮细胞呈不同程度的分化不良,排列紊乱,极向改变,细胞大小不·,形状不规则,核增大、染色加深、核分裂象增多,并见多核细胞,如果增/卜、分化不良的细胞累及__卜皮全层为Hl级不典型增生,累及下2/3为H级不典型增生,累及下1/3层为I级不典型增乙卜。 3扫描电镜结果:币常__!二皮细胞排列整齐,细胞表面光滑,微皱璧分布均匀有序,排列规则,细胞边界整齐微隆起,细胞间分界清楚。扫描电镜下不典型增生细胞表面欠平整,细胞边界不清,表面增厚、不均、呈斑块样改变,出现小孔。细胞表面微皱璧走行紊乱,分布不均匀,部分区域皱璧稀少,出现粗人、肿胀、断裂,不典型增生严重部位的细胞表面上述改变更为明显复杂,常有深洞出现,深洞周边的微皱璧断裂、增粗变硬近似癌细胞的改变。癌组织__卜皮细胞排列高低不平,细胞表面不整,斑块状改变。表面微皱璧分布稀疏,走行方向紊乱无序,不规则。皱璧有粗大、断裂、缺失、僵硬感。出现大的孔洞,部分细胞表面破坏界限不清。 4透射电镜结果:癌细胞的胞核增大,核浆比例失调,核仁变大且可出现异形核、双核仁等畸形变现象;细胞膜常溶解甚至消失,线粒体肿胀峭消失,粗面内质网明显肿胀,甚至自溶;糖原颗粒密度低于正常和不典型增生细胞。不典型增生细胞的胞核比正常细胞有所增大,核仁也相对增大。但异形率和增大程度低于癌细胞。细胞器结构比较清晰,线粒体肿片长,糖原颗粒的密度较J_H常细胞有所减少。 2中文摘要不典型增生的棘细胞与}「常细胞的细胞膜完整、桥粒相对李青晰。 5糖原和蛋白定量结果:经化学成分分析显小食怜癌到}.织,}’性糖含量低于11一‘i附}!.织,有非常显著性并异(p<0.01);但两种组织中蛋自含量无显著性差异(p>0.05)。 6DNA含量结果:}卜常组织明显低于癌组织的Dl位,差异有显著性(p<0.01);正常组织的Dl值与轻度不典型增/1二以及中、重度不典型增生组织之间没有显著性差异 (p>0.05);轻度不典型增生组织的Dl值明显低于癌组,差异有一显著性(p<0.05);轻度不典型增产}省l织与,}‘、币度不典型增生组织的DI值没有明显差异(p>0.05);’}’、重度不典型增生组织与礴组值的Dl值也没有明极差异(p>0 .05)。 同样,正常组织明显低于癌组织的PI值,差异有显著性(p<0.05);正常组织的Pl值与轻度不典型增生组织以及中、重度不典型增生组织间没有显著性差异(p>0.05);轻度不典型增生组织的PI值明显低于癌组,差异有显著性(p<0.01);轻度不典型增生与中、重度不典型增广I::.的差别没有统计一学意义(p>0.05);中、重度不典型增生组织与癌组织之间的PI子六旅别没有统计学意义(p>0.05)。 7端粒酶的表达变化:_L巨常组织端粒酶的含量明显低于癌组织(p<0.01);11-:常组织与轻度不典型增‘}二fll.织的端粒酶差异没有统计学意义(p>0.05);l卜常纠.织的端粒酶表达量低于中、重度小典型增生组织(p<0.05):癌红}织和中、重度不典型增z}几组织端粒酶比轻度不典型增广卜组织高,差别有统计学意义(p<0.01);中、重度不典辉灯曾3中文摘要生组织与癌组织的端粒酶表达没有明显变化(p>0.05)。 端粒酶阳性表达率:在20例正常人食管上皮组织有4例端粒酶表达阳性,阳性率为巧%;11例轻度不典型增生组织端粒酶农达均阴性;11例重度不典型增生组织,},5例表达阳性,阳性率为45.5%;23例鳞癌组织有15例表达阳性,阳性率为65.2%。 正常组织和轻度不典型增生组织端粒酶阳性表达率明?
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