骨保护素启动子区基因多态性与冠心病血管钙化发生的关系

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目的分别统计分析在正常对照组、冠心病(Coronary artery disease,CAD)组和冠心病钙化(Vascular calcification,VC)组、非钙化组中,骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)启动子区基因950T/C和149T/C位点的分布特点,及其血清OPG的水平,以了解血清OPG水平及其启动子区基因多态性与冠心病血管钙化之间的关联。方法本研究选取2015年4月至2018年10月间就诊于天津市胸科医院,并行冠状动脉造影(Coronary arteriograpy,CAG)检查的患者为研究对象,共482例,按造影结果可分为正常对照组148例,冠心病组334例,而冠心病组中包括钙化组150例和非钙化组184例。记录研究对象的年龄、性别、吸烟史、既往高血压(Hypertension,HTN)、糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)病史等一般临床资料。采集研究对象入院次日晨起空腹的静脉血送至生化室,检测血糖、血脂、血常规、肝肾功能、心肌酶、凝血功能等多项指标,并记录检测结果。通过采集的研究对象的血液提取DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymophsis,PCR-RFLP)技术,了解OPG基因型在正常对照组、冠心病组和冠心病钙化组、非钙化组的患者中的分布情况,判断OPG启动子区950T/C和149T/C位点基因多态性与冠心病及血管钙化之间的关系。另外,随机抽取了对照组66例,冠心病非钙化组73例,冠心病钙化组86例,采用ELISA检测其血清OPG、核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear factor-ΚB ligand,RANKL)、、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的水平,观察各指标浓度在正常对照组、冠心病组和冠心病钙化组、非钙化组中的分布有无差异。结果1.对照组与CAD组、CAD钙化组在性别、年龄、吸烟史、DM病史、HDL-C、ApoA1、ApoA1/ApoB、LP(a)、CK、TNT、Hcy、UA指标中的差异具有统计学意义(P<0.05),而在HTN病史、CAD家族史、TG、TC、LDL-C、ApoB、FBG、CK-MB、ALP指标中的差异则无统计学意义(P>0.05)。2.CAD钙化组与非钙化组则在年龄、LP(a)指标中的差异具有统计学意义(P<0.05),而在性别、吸烟史、DM病史、HTN病史、CAD家族史、TG、TC、LDL-C、HDL-C、ApoA1、ApoA1/ApoB、ApoB、FBG、CK-MB、CK、TNT、Hcy、UA、ALP指标中的差异则无统计学意义(P>0.05)。3.本研究发现OPG启动子区950T/C和149T/C位点的基因类型有TT、TC、CC三种类型,950T/C位点以TC型多见,TT型居中,CC型最少,等位基因以T多见,C等位基因少。而149T/C位点基因型以TT型多见,TC型居中,CC型最少,等位基因以T多见,C等位基因少。4.950T/C位点基因型分布在对照组与CAD组、CAD钙化组间的差异有统计学意义(P<0.05),而在CAD钙化组与非钙化组间无明显差异(P>0.05)。149T/C位点基因型分布则在各组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。5.与对照组相比,CAD组血清OPG、sRANKL水平较高,而血清MMP-9、MCP-1水平较低,但其差别无统计学意义(P>0.05)。与非钙化组及对照组相比,钙化组血清sRANKL水平明显较高,其差异具有统计学意义(P<0.05)。而血清OPG、MMP-9、MCP-1水平的升高并无统计学意义(P>0.05)。结论1.与冠心病发生发展相关的因素有:性别、年龄、吸烟史、糖尿病病史、HDL-C、ApoA1、ApoA1/ApoB、LP(a)、CK、TNT、Hcy、UA。与血管钙化相关的因素主要有年龄、LP(a)。2.OPG启动子区的基因多态性与CAD及血管钙化的发生发展有关。950T/C位点基因型分布与冠心病及钙化存在相关性,而149T/C位点基因型分布则无明显相关性。血清sRANKL水平与冠状动脉钙化相关,表明OPG系统参与AS、血管钙化的疾病进展,提示了血清OPG、sRANKL作为预测冠状动脉疾病患病率和严重程度的新型生物标志物的可能性。
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