乳糖发酵型肠杆菌中耐药基因在污水处理过程中的变化

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近些年来,抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)作为一类新兴环境污染物受到广泛关注,污水处理过程中所含ARGs和耐药菌(ARB)的变化更是研究热点之一。但目前对污水处理过程中不同微生物所含ARGs的变化尚缺乏了解,特别是对那些与人体关系密切的肠杆菌科细菌所含ARGs的变化还知之甚少。本研究选取一个市政污水处理厂和一个抗生素药厂内的废水处理站,以乳糖发酵型肠杆菌(LFE)及其所含的ARGs为主要研究对象,采用高通量测序技术和传统细菌分离培养技术,分别从进水、活性污泥、出水水样中分离筛选培养出LFE和耐四环素乳糖发酵型肠杆菌(TR-LFE)各160株,综合分析三个水样及LFE体内抗生素抗性基因类型及丰度的变化,并重点分析了四环素类抗性基因类型及丰度的变化。得到以下研究结论:1.两个污水处理厂出水水样中LFE、TR-LFE数量相比于进水水样中均减少了1~3个数量级,削减效果明显。但耐药菌的比例却有所增加,市政污水处理厂中TR-LFE数量占LFE的比例从10%增加到33%,抗生素制药厂废水处理站中TR-LFE数量占LFE的比例分别从3%增加到12%。2.从市政污水处理厂中分离筛选的LFE(共480株)中检测到17类抗生素抗性基因和14种四环素类抗性基因;分离筛选的TR-LFE(共480株)中检测到17类抗生素抗性基因和15种四环素类抗性基因;从进水、活性污泥、出水三个水样中检测到20类抗生素抗性基因和31种四环素类抗性基因。经污水处理后,水样和各自从中分离的LFE、TR-LFE中抗生素抗性基因总丰度降低了9%~44%。3.从抗生素制药厂废水处理站中分离筛选的LFE(共480株)中共检测到17类抗生素抗性基因和11种四环素类抗性基因;从进水、活性污泥、出水三个水样中检测到17类抗生素抗性基因和28种四环素类抗性基因。经废水处理后,水样和各自从中分离的LFE中抗生素抗性基因总丰度降低了21%~72%。4.通过对比分析发现市政污水处理厂中ARGs类型多于抗生素药厂废水处理站中ARGs类型,但其ARGs丰度低于抗生素药厂废水处理站中ARGs丰度。两个污水厂出水水样中均存在耐药菌和抗生素抗性基因,可见污水处理厂是耐药菌及抗性基因的污染源之一。
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