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背景：高迁移率族蛋白1(HMGB1)生理状态下以非组蛋白的形式存在于细胞核中,可在炎症反应晚期释放至胞外发挥炎症因子的作用。外源性重组HMGB1可以引起内毒素耐受。内毒素耐受是机体抑制自身炎症反应过度发展的有效手段,表现为抑制TNF-α等促炎因子的表达而并不抑制IL-10等抑炎因子的表达。虽然内毒素耐受能在一定程度上抑制炎症反应的泛滥,但若任其发展,便会削弱机体的防御能力,增加二次感染甚至死亡的几率。目前有关内毒素耐受机制的研究尚无定论,我们不知道该过程通过什么来介导,是否存在关键的启动因子。目的：研究经典内毒素耐受(小剂量LPS引起)的发生机制,说明内源性HMGB1在其中不可替代的独特作用,并阐明其机制。方法：课题分为四个部分。第一章,应用重组HMGB1或经热处理的重组HMGB1预处理小鼠1小时后,给予其大剂量LPS打击, ELISA检测血清中TNF-α的含量,WB及免疫组织化学染色法检测肝脏中其中IRAK-M的表达；第二章,应用小剂量LPS预处理小鼠24小时后,给予其大剂量LPS打击,ELISA检测血清中HMGB1的含量,WB检测肝脏中HMGB1的表达；应用小剂量LPS预处理RAW264.7细胞18小时后,给予其大剂量LPS打击,免疫荧光染色观察HMGB1的核-胞浆转移情况；第三章,应用小剂量LPS预处理小鼠,0.5,4和10小时后分别连续腹腔注射正丁酸钠,24小时后腹腔注射大剂量LPS, RT-PCR检测肝脏中TNG-α mRNA的表达,WB检测肝脏中HMGB1的表达,ELISA检测血清中TNF-α的含量；第四章,应用小剂量LPS预处理小鼠,2,12,22小时后分别连续腹腔注射HMGB1中和抗体,24小时后腹腔注射大剂量LPS, ELISA检测血清中TNF-α的含量,WB检测肝脏中IRAK-M的表达,WB检测NF-κB在肝脏胞核中的表达,EMSA检测肝脏中NF-κB与DNA的结合能力。结果：第一章,重组HMGB1预处理1小时可以引起内毒素耐受,其机制与上调负性调控蛋白IRAK-M的表达有关,与混在其中的微量LPS无关；第二章：小剂量LPS预处理24小时可以引起内源性HMGB1表达及释放的增加；第三章,HMGB1抑制剂正丁酸钠可以抑制小剂量LPS引起的内毒素耐受；第四章,HMGB1中和抗体可以通过下调IRAK-M的表达,恢复NF-κB的活性来阻碍LPS引起的内毒素耐受现象。结论：小剂量LPS引起的内毒素耐受现象需要内源性HMGB1的参与,其机制与上调IRAK-M的表达,抑制NF-κB通路的活性有关。