成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者外周血CD4+T细胞IL-17基因表及其启动子区甲基化状态的研究

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目的:研究成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者(LADA)外周血CD4+T细胞IL-17基因表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨LADA患者IL-17基因的表达与其启动子区的甲基化水平的关系。  方法:密度梯度离心法分离15例LADA患者和15例正常对照者的外周血单个核细胞,免疫磁珠法分选CD4+T细胞,抽提总RNA,逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR检测IL-17的mRNA表达水平;取上述研究对象外周血3ml于促凝管中,离心后分离血清,ELISA检测血清中IL-17蛋白表达水平;亚硫酸氢钠测序检测IL-17基因启动子区的甲基化状态。  结果:  1.LADA患者CD4+T细胞中IL-17 mRNA表达水平较正常对照者明显升高(P=0.01);  2.ELISA结果显示LADA患者血清中IL-17水平较正常对照者增加(P=0.01);  3.亚硫酸氢钠测序LADA患者CD4+T细胞IL-17基因调控区域的DNA甲基化水平降低(P=0.02),且与IL-17 mRNA表达负相关(N=30,r=-0.39,P=0.03)。  结论:成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者外周血CD4+T细胞IL-17表达升高与其启动子区的低甲基化相关。  
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