乳腺癌已成为世界上女性常见的恶性肿瘤之一，我国乳腺癌发病率逐年上升，并且发病率趋于年轻化。因此，开发治疗和预防乳腺癌的方法已成为当今相关科研工作者的研究热点之一。肿瘤与一些信号通路有着非常紧密的关联，随着人们对肿瘤细胞信号转导通路研究的不断深入，筛选能对肿瘤细胞信号转导进行调节的先导化合物已成为抗肿瘤新药研究领域的任务之一。　　老鹳草素是从植物老鹳草中提取分离获得的多酚类化合物，具有抗氧化、抗菌、抗癌、抗病毒以及抗高血压等多种药理活性。老鹳草素的抗肿瘤活性虽然已有报道，但对其抗肿瘤的机制并未有深入的研究。因此，本论文系统的研究了老鹳草素体外抑制MCF-7细胞增殖的活性及其初步分子作用机制，为老鹳草素新药研究提供科学数据。本论文主要研究结果如下:　　1.确定了老鹳草素对乳腺癌MCF-7细胞株具有显著的增殖抑制效果。　　老鹳草素对几种肿瘤细胞株有增殖抑制效果，特别是对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用最强，IC50值为9.94±0.65μM，并且呈现浓度和时间依赖性特征。此外，老鹳草素对正常的小鼠单核巨噬细胞Raw264.7的IC50值是65.69±0.83μM大于其它肿瘤细胞株，表明老鹳草素对正常细胞株的毒性较小。老鹳草素对MCF-7细胞24 h、48 h和72h的IC50值分别是42.32±0.23μM、17.98±0.62μM和9.94±0.38μM。同时，老鹳草素作用于MCF-7细胞后，可以观察到其细胞染色质凝聚到一起并且细胞数量变少，初步断定老鹳草素可以诱导MCF-7细胞发生凋亡。　　2.老鹳草素能够诱导MCF-7细胞发生凋亡。　　采用罗丹明123染色法检测老鹳草素作用于MCF-7细胞后线粒体跨膜电位的变化情况，结果膜电位呈现明显地下降趋势;用Annexin V-FITC/PI荧光检测法检测老鹳草素对MCF-7细胞后细胞凋亡的影响，实验结果显示老鹳草素使细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸外翻，从而诱导MCF-7细胞的凋亡。　　3.老鹳草素能够通过p38 MAPK凋亡途径诱导MCF-7细胞的凋亡。　　利用Western blotting法检测不同浓度的老鹳草素对相关蛋白表达的影响，实验结果如下:　　(1)用老鹳草素处理后，与空白对照相比，Cleaved PARP与Cleaved caspase-3蛋白的表达量均随着药物浓度的增加而升高，说明PARP被caspase-3剪切，使PARP不能与DNA结合，进而不能发挥正常功能，肿瘤细胞发生了凋亡。　　(2)在老鹳革素作用下，抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达量随着时间的增加而减小，磷酸化的Bcl-2蛋白含量升高，说明老鹳草素可以负调Bcl-2蛋白，增加phosphorylationBcl-2。在细胞内信号通路中有几种不同的激酶会参与调节磷酸化Bcl-2。为了确定哪种激酶参与了调节磷酸化Bcl-2，又对MAPK家族的几种蛋白进行了研究。结果表明，老鹳草素能够抑制Akt磷酸化，同时可以显著引起p38 MAPK的磷酸化。　　(3)为了进一步检测老鹳草素引起的凋亡是否与p38蛋白的激活有关，检测了p38抑制剂加入后，一些相关蛋白的变化情况。加入老鹳草素后细胞的存活率下降，然而同时加老鹳草素和p38抑制剂组，存活率明显上升，也就是说p38抑制剂会削弱老鹳草素对细胞的影响。加入了p38抑制剂后，老鹳草素引起磷酸化的Bcl-2、负调Bcl-2以及引起cleaved-PARP表达这些现象都有所减弱。表明老鹳草素引起细胞凋亡是与p38紧密相关的。　　(4)为了检测老鹳草素引起的凋亡是否与ROS是否有关，检测了NAC处理后，ROS以及相关蛋白的表达情况。结果显示ROS参与乳腺癌MCF-7细胞凋亡。利用DCFH-DA荧光染色法和Western blotting法进行检测老鹳草素对细胞中ROS的变化影响和ROS对老鹳草素诱导细胞凋亡的影响。实验结果表明，老鹳草素能够升高MCF-7细胞中ROS的含量，但加入ROS抑制剂NAC后，能够抑制老鹳草素诱导MCF-7细胞的凋亡。　　综上所述，老鹳草素可以抑制MCF-7细胞的增殖，这种抑制作用与药物诱导的细胞凋亡紧密相关。老鹳草素通过ROS介导的p38MAPK途径诱导MCF-7细胞发生凋亡。以上这些研究结果为进一步探究老鹳草素诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制提供基础数据，同时将为其开发抗肿瘤药物提供理论支持和科学依据。