三丁酸甘油酯对生长中期草鱼生产性能和肠道屏障功能的影响

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本文研究三丁酸甘油酯对生长中期草鱼生产性能和肠道屏障功能的影响,并依据不同标识确定三丁酸甘油酯在生长中期草鱼的最适添加量。试验选取368.89±0.86 g的450尾健康草鱼随机分为六个处理,3个重复/处理,共18个网箱,每网箱25尾鱼。处理一至五饲喂设计水平0、150、300、450、600 mg/kg的三丁酸甘油酯(纯度≥50%)饲粮(实测水平0、68.33、155.33、245.67、287.67 mg/kg),处理六饲喂设计水平500mg/kg的微囊丁酸钠(纯度≥30%)饲粮(实测水平164.83 mg/kg),试验为期56天。研究表明:饲粮中添加适宜水平的三丁酸甘油酯能够提高生长中期草鱼的采食量、增重百分比、特定生长率、肠体比、肠道皱襞高度、胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活力提高草鱼生产性能。通过体外模拟体内消化法发现三丁酸甘油酯能够到达草鱼肠道,在草鱼肠道前段缓慢分解、中后段迅速分解释放出丁酸,从而对肠道起保护作用。进一步研究表明:(1)适宜水平的三丁酸甘油酯能够增加肠道挥发性脂肪酸的含量和肠道有益菌的数量,减少肠道有害菌的数量(P<0.05);(2)三丁酸甘油酯能够增强草鱼肠道结构完整性,饲粮中添加150~450 mg/kg的三丁酸甘油酯,(1)减少肠道丙二醛和蛋白羰基的含量,提高肠道抗氧化酶(Cu Zn SOD、CAT、GPx1a、GPx1b、GPx4a、GPx4b)的m RNA水平及T-SOD、CAT、GPX、GST活力和GSH含量,上调了核Nrf2的蛋白水平和m RNA水平,下调了Nrf2胞质锚定蛋白Keap1a和Keap1b m RNA水平(P<0.05),增强细胞完整性;(2)上调肠道紧密连接蛋白claudin-c、claudin-3、claudin-7、claudin-11、occludin、ZO-1、ZO-2和粘附链接蛋白E-cadherin、α-catenin、afadin、nectin的m RNA水平,下调孔状疏松蛋白claudin-12、claudin-15a、claudin-15b以及相关信号分子Rho A、ROCK、MLCK和MNII的m RNA水平和Rho A蛋白水平,增强肠道结构完整性(P<0.05);(3)三丁酸甘油酯能够提高肠道免疫功能,饲粮中添加150~450 mg/kg的三丁酸甘油酯,(1)提高肠道抗菌物质ACP和LZ的活力以及C3、C4和Ig M的含量,上调抗菌肽Hepcidin、LEAP和β-defensin-1的m RNA水平(P<0.05);(2)下调促炎细胞因子TNF-α、IL-1β的m RNA水平,上调抗炎细胞因子TGF-β1、IL-10的m RNA水平,上调抑炎信号分子JAK1、JAK2、JAK3、STAT2、STAT3a、STAT3b1、STAT3b2的m RNA水平和P-STAT3的蛋白水平(P<0.05),增强肠道免疫功能。同时,本研究发现300 mg/kg的三丁酸甘油酯对生长中期草鱼生产性能、肠道结构完整性和肠道免疫功能的作用效果要优于微囊丁酸钠,根据草鱼PWG和SGR回归曲线,三丁酸甘油酯产品的作用效果是微囊丁酸钠产品的1.86、2.09倍。综上所述:饲粮中添加150~450 mg/kg的三丁酸甘油酯能够提高生长中期草鱼生产性能,并能够在肠道释放丁酸,从而增强肠道结构完整性和免疫功能。三丁酸甘油酯增强肠道结构完整性和免疫功能主要通过以下途径:(1)可能通过激活Nrf2/Keap1信号途径提高肠道的抗氧化能力;(2)可能通过抑制Rho A/ROCK信号途径增强肠道细胞间结构完整性;(3)可能通过提高肠道抗菌物质的产生及上调JAK/STAT信号途径减少炎症反应,提高肠道的免疫功能。同时,研究发现三丁酸甘油酯的效果优于微囊丁酸钠。以SGR、肠道粘膜的通透性(DAO)和后肠溶菌酶活力(LZ)为标识,确定出三丁酸甘油酯(以三丁酸甘油酯纯品计)在草鱼(初重368g~末重643g)饲粮中最适添加量分别为137.50、161.94、155.30 mg/kg。
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