共轭亚油酸对草鱼低氧应激后能量代谢、组织损伤和抗氧化能力的影响

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本试验以草鱼为研究对象,通过在饲粮中添加不同水平的共轭亚油酸,探寻在急性低氧应激条件下,共轭亚油酸对草鱼组织损伤、能量代谢以及抗氧化方面的影响,并基于损伤缓解情况确定草鱼低氧应激下共轭亚油酸的适宜添加量。试验选用饲喂了60天不同水平共轭亚油酸饲粮(共轭亚油酸添加量为:0、3、6、9、12、15 g/kg)的草鱼(15尾/处理),每5尾一组置于1 mg/L溶氧水体中进行为期4天的低氧应激试验。结果表明,低氧应激对草鱼血液成分产生影响,造成了能量代谢异常,并且引起了鳃和肝脏的组织损伤,同时还导致了氧化损伤和内质网应激。进而研究发现,共轭亚油酸可以有效缓解低氧应激带来的负面影响。(1)适宜水平的共轭亚油酸(6-9 g/kg)显著降低了血清中TG、TC和GLU以及肝脏中ATPase和LDH的含量(P<0.05),改善了低氧应激引起的草鱼能量代谢异常。(2)饲料中添加适宜水平的共轭亚油酸(6 g/kg)可以有效缓解低氧应激导致的草鱼鳃和肝脏组织结构损伤。改善了低氧引起的鳃上皮细胞聚集或脱落,鳃小片数量增加,鳃小片基部褶皱增多,以及肝脏部分区域坏死且在肝脏中形成空洞的情况。(3)适宜水平的共轭亚油酸显著降低了草鱼血清GOT和GPT的含量(P<0.05),表明其降低了低氧应激引起的肝脏损伤。适宜水平的共轭亚油酸可以显著提高血液中红细胞数量(P<0.05),并且显著降低红细胞渗透脆性(P<0.05),增强了草鱼红细胞对氧气的运输能力以及对低渗溶液的抵抗力。(4)添加适宜水平的共轭亚油酸也可以对低氧应激下草鱼的抗氧化性能产生影响:(1)低氧应激导致草鱼产生过量的ROS,适宜水平的共轭亚油酸显著降低了草鱼ROS以及脂质过氧化物MDA的含量(P<0.05);(2)添加适宜水平的共轭亚油酸可以抑制ROS产生能力,显著下调了与ROS的产生相关的NOX1、NOX2、NOXA1、NOXO1a、NOXO1b、P22phox、P47phox、P67phox m RNA水平以及NOX1蛋白水平(P<0.05);(3)添加适宜水平的共轭亚油酸可以提升ROS的清除能力,显著提高了草鱼鳃组织中GPx、GST、SOD、CAT等抗氧化酶的活性(P<0.05),以及显著上调了鳃中CAT、GPx1a、GPx1b、GPx4a、GPx4b、GSTR、GSTO1、GSTO2、GSTP1、GSTP2和肝脏中Cu Zn SOD、CAT、GPx1a、GPx1b、GPx4a、GPx4b m RNA水平(P<0.05)。进一步研究表明,抗氧化能力的提升可能与添加了适宜水平的共轭亚油酸后Nrf2m RNA水平的上调以及核Nrf2与总Nrf2的蛋白水平的上调还有Keap1a m RNA水平下调有关(P<0.05)。(5)适宜水平的共轭亚油酸可以显著下调鳃和肝脏中CHOP和GRP78的m RNA水平(P<0.05),并且显著下调IRE1、ATF6、PERK三种内质网应激产生相关转录因子的蛋白水平(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加适宜水平的共轭亚油酸可以有效缓解因低氧应激造成草鱼鳃和肝脏的组织损伤,提升草鱼抗氧化能力以及缓解草鱼因低氧产生的能量代谢异常和内质网应激。根据ROS、MDA的含量为标识,确定了草鱼低氧应激下共轭亚油酸的适宜添加量分别为7.09和8.73 g/kg。
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