【摘 要】
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辣椒脉黄病毒(Pepper vein yellows virus,Pe VYV)属于马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),传播方式仅限于蚜虫传播和通过嫁接传播,病毒发生侵染后,辣椒叶片会出现卷曲,叶脉会产生黄化等症状,影响辣椒品质及产量。本研究针对云南、安徽、浙江等辣椒产区的共263份样品进行了检测,通过转录组高通量分析以及RT-PCR确认,明确云南地区Polerovirus病毒中Pe VY
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辣椒脉黄病毒(Pepper vein yellows virus,Pe VYV)属于马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),传播方式仅限于蚜虫传播和通过嫁接传播,病毒发生侵染后,辣椒叶片会出现卷曲,叶脉会产生黄化等症状,影响辣椒品质及产量。本研究针对云南、安徽、浙江等辣椒产区的共263份样品进行了检测,通过转录组高通量分析以及RT-PCR确认,明确云南地区Polerovirus病毒中Pe VYVs的发病率为60.7%;Potyvirus病毒中Chi RSV的发病率为44.0%,Chi VMV的发病率为23.6%;Orthotospovirus病毒中TZSV的发病毒为15.7%。安徽地区Potyvirus病毒中Chi RSV的发病率为75.4%;Tobamovirus病毒中TMGMV的发病率100%。浙江地区Potyvirus病毒中Chi VMV的发病率为发病率60.0%;Polerovirus病毒中Pe VYVs的发病率为60.0%。针对云南地区检出率较高的Polerovirus病毒开展研究,文山地区收集的89份样品中,其中58份检出Pe VYV。同时根据Contig结果以及5’和3’RACE获得一条全长6015nt的新病毒序列,命名为朝天椒脉黄病毒(Pod pepper vein yellows virus,Po Pe VYV),与已报道的Pe VYVs的6个代表种同源性为84.6-87.0%,与烟草扭脉病毒(Tobacco vein distorting virus,TVDV)同源性为87.8%。Po Pe VYV的5’端(5’NCR-P3)与Pe VYV-3(KP326573)具有93.1%的同源性,3’端(RTD-3’NCR)与TVDV具有91.7%的同源性。氨基酸、核苷酸、RDP4以及进化树分析的结果表明,Po Pe VYV在4126-5192nt区段具有一个重组事件,Po Pe VYV可能是由Pe VYV-3和TVDV重组产生的。为确认Po Pe VYV的致病症状,构建以35S驱动的全长侵染性克隆载体p CBPo Pe VYV,利用农杆菌介导法侵染朝天椒和本氏烟,RT-PCR确认病毒发生了系统侵染,纯化后的病毒粒子能够通过电镜观察到直径约25nm的球形粒子,表明Po Pe VYV侵染性克隆已构建成功。为确认病毒介体传播效率,以本氏烟中纯化的Po Pe VYV病毒粒子为研究对象,表明桃蚜获毒率为100%,但接毒效率较低,仅为17-50%。高通量和RT-PCR确认两条番茄丛矮病毒类似相关RNA(Tombusvirus-like associated RNAs,tla RNAs),与TBTDa RNA(Tobacco bushy top disease-associated RNA,EF529625)同源性较高,Po Pe VYV的tla RNA可显著提高Po Pe VYV的传毒效率。
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