目的类风湿性关节炎是一种慢性进行性的自身免疫性疾病,严重威胁人类的健康。现在人们认为细胞因子网络调节异常是它的免疫病理机制和效应。以前的研究已证实通过对这个网络上的分子进行抑制来治疗本病已显示出特异性好,效果显著的特点。JNK这条通路在类风湿性关节炎中占有重要地位,且其中游的分子又仅有MKK4/7两个,故可以认为对这个位点的抑制是简单,且效果名显的。本实验通过检测丝裂酶原活性蛋白激酶激酶7(MKK7)在类风湿患者,骨性关节炎患者,正常人滑膜中的表达情况。探讨MKK7与类风湿关节炎发病的相关性。为进一步明确类风湿关节的发病机制奠定基础,为临床治疗提供一定的理论依据。方法实验组选取中国医科大学第一附属医院骨科2006年7月～2007年9月行膝关节腔清理术和关节置换术的RA患者10例,取其膝关节滑膜作为标本。。RA:其中男4例,女6例,年龄38岁～68岁,平均52.5岁。病程4个月～14年,平均45.2个月。对照组选取中国医科大学第一附属医院骨科2006年7月～2007年9月行膝关节腔清理术,探查术和关节置换术的OA患者7例,正常人6例,分别取滑膜组织作为标本。OA:男3例,女4例,年龄42～65,平均53岁。病程2个月～20年,平均70月。正常组:男3例,女3例,年龄28～43,平55岁。病程1个月～6个月,平均4个月。以计算机为辅助合成两条引物,以RT-PCR技术检测三组滑膜中的MKK7 mRNA的含量并进行比较,Western-blot技术检测MKK7在RA组和两对照的表达及比较他们之间的差异(以磷酸化和非磷酸化的MKK7两种抗体进行检测,以便说明这种蛋白的活性)。用计算机软件计算两种结果的灰度值,进行对比(图像分析系统LeicaQ550 IW:灰度分级0～255级,0级为最深,255级为最浅)。所有数据采用SPSS11.5 ForWindows统计软件处理,阳性率比较采用X~2检验,以P＜0.05作为有统计学意义的检验水准。结果RT-PCR结果显示:MKK7 mRNA的含量在实验组和对照组中均有表达,且实验组与对照组之间的差别具有统计学意义(P＜0.05)。Western-Blot结果显示:以非磷酸化的MKK7抗体进行蛋白定量的三组标本中均有MKK7的表达,实验组与对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)。以磷酸化的MKK7抗体进行蛋白定量,见实验组仍有大量蛋白表达,但两对照组蛋白含量很少。统计学上实验组与对照组之间的有明显差异(P＜0.05),对比两种抗体灰度值,证明MKK7在类风湿关节炎中的活性明显高于两对照组。(灰度值分析见三格表)结论本研究表明MKK7在RA的滑膜中含量多且活性高,这可能与RA的发病密切相关,通过对其阻断可能会部分缓解本病的病情。