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【目的】 1. 比较ARMc8(Armadillo repeat containing 8)基因在人鼻咽癌组织与人正常鼻咽上皮组织中的表达情况,初步证明ARMc8在鼻咽癌组织表达水平显著高于正常鼻咽上皮组织,有可能是鼻咽癌发生发展的促癌基因; 2. 观察沉默内源性ARMc8表达对鼻咽癌细胞迁移能力的影响。 【方法】 1. 随机采集48例人鼻咽癌组织和人正常鼻咽上皮组织(经病理学确诊其中29例鼻咽未分化非角化性癌组织,19例正常鼻炎上皮组织),用Trizol法提取组织RNA,经逆转录,用实时荧光定量PCR技术检测ARMc8在人鼻咽癌组织与正常鼻咽上皮组织中的表达情况。 2. 基因引物的设计与合成由上海生工生物工程股份有限公司完成,特异性siRNA的设计与合成由上海吉玛制药技术有限公司完成; 3. 从5株不同的鼻咽癌细胞株中筛选出ARMc8表达最高的5-8F细胞株,以脂质体Lipofectamine? 3000瞬时转染法将ARMc8特异性siRNA转染进5-8F细胞中,以沉默ARMc8的表达; 4. 细胞划痕实验、Transwell 小室实验检测沉默 ARMc8 的表达后鼻咽癌细胞的迁移能力。 【结果】 1. ARMc8基因的表达。人鼻咽癌组织ARMc8表达水平(0.041±0.043)比正常组织ARMc8表达水平(0.019±0.012)更高,差异有统计学意义(p<0.05); 2. 细胞株和siRNA的筛选。5-8F细胞(0.029±0.022)的ARMc8表达水平明显高于其他4株细胞(0.013±0.008、0.010±0.008、0.006±0.001、0.010±0.002),选择5-8F细胞进行后续实验。siRNA-1071(0.104±0.019)的干扰效率明显优于siRNA-680(0.211±0.015)和 siRNA-1418(0.403±0.086),选择 siRNA-1071进行后续实验; 3. 干扰效果的鉴定。转染后24h,特异性siRNA(0.124±0.019)可明显降低鼻咽癌细胞中ARMc8的mRNA表达量(Control组1.000±0.000,NC组1.179 ±0.613),差异有统计学意义(p<0.05); 4. 细胞迁移能力的检测。与对照组相比,siRNA组(0.448±0.115)的细胞划痕愈合能力明显低于Control组(0.771±0.034)和NC组(0.773±0.094),差异有统计学意义(p<0.05);穿过Transwell上室的细胞数siRNA组(61.333 ±34.118)亦明显少于Control组(162.600±16.933)和NC组(157.467±29.804),差异有统计学意义(p<0.05)。 【结论】 ARMc8 基因在人鼻咽癌组织中的表达显著高于人正常鼻咽上皮组织,在鼻咽癌细胞株中用siRNA干扰ARMc8基因的表达能使细胞的迁移能力明显减弱。