刺参中多糖的提取分离、结构表征及其核苷类物质的分析

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:tashon123
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二十一世纪是人类开发利用海洋资源的新世纪。近年研究发现,海参体内含有许多具有重要生物学活性的物质,这些生物活性物质具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂等作用。本论文是采用福建省霞浦养殖基地及山东威海刺参为研究样本,对刺参活性成分刺参多糖和核苷类物质进行分析,为刺参的进一步研究和药用价值发掘提供物质基础。论文共分为3章:1.刺参多糖微波-超声协同提取工艺的研究目的:以刺参多糖的提取率和纯度为评价指标,优选刺参多糖的提取工艺。方法:以苯酚-硫酸法测定刺参多糖的纯度,并以提取率和纯度作为评价指标,采用正交试验法对刺参多糖的提取工艺进行优选。结果:以D-葡萄糖醛酸为对照品并确定刺参多糖超声-微波协同提取的最佳提取工艺为:取刺参粉末加入15倍量蒸馏水,微波功率80 W,提取4次,每次30 min。结论:利用超声微波协同提取刺参多糖工艺科学合理、稳定可行,提取率较高。2.刺参多糖的分离纯化、结构表征及对小鼠急性酒精肝损伤保护作用的研究目的:建立刺参多糖分离纯化和结构表征方法,并研究其对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:采用水提醇沉法制备粗刺参多糖,用DEAE-Sepharose F.F对其分离纯化;用HPGPC法测定其分子量;柱前衍生化HPLC、LC/MS分析其单糖组成;并应用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)及刚果红实验进行结构表征;最后通过测定小鼠血清中AST和ALT及肝脏中SOD和MDA值研究其对小鼠急性肝损伤的保护作用。结果:精制的刺参多糖为淡黄色固体,平均分子量为2.291×10~5Da;主要由葡萄糖和岩藻糖组成,且二者摩尔比为:1:8.01。药理实验显示刺参多糖对小鼠急性酒精肝损伤具有一定保护作用。结论:该研究可为今后更深入地研究刺参多糖的结构特征和生物活性提供理论依据。3.LC-MS法分析刺参中5种核苷类物质目的:采用LC-ESI/MS法同时分析不同提取工艺的刺参中5种核苷类成分(尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷和腺苷)。方法:色谱条件为:色谱柱:Agilent ZORBAX XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:20 mmol/L乙酸铵水溶液(A)–乙腈(B),梯度洗脱,流速:1.0mL/min;检测波长:254 nm;柱温:25℃;进样量:20μL;质谱检测,采用串联质谱电喷雾离子源,正电离扫描。结果:不同提取工艺的刺参中均含有尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷和腺苷成分。结论:LC-ESI/MS法分析刺参中5种核苷类物质具有快速、简便的特点,可用于核苷类物质的分析。
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